Abstract
Proposed is the method for simultaneous isolation and purification of three cholera vibrio key pathogenicity factors (cholera toxin, toxin-co-regulated adhesion pili, O1 antigen Ogawa or Inaba), which are main protective antigens, from previously constructed recombinant Vibrio cholerae strains 2415 Inaba and KM 206 Ogawa. Immunologic activity of the preparations was confirmed using polyclonal high-active specific antisera. Purified antigens can be used for creation and improvement of prophylactic and diagnostic preparations.
Highlights
Проблема борьбы с холерой – опасной эпидемической болезнью, причиной смертности людей во многих странах, не перестает быть актуальной
Электрофореграммы лизата клеток штамма – продуцента протективных антигенов и выделенного из него белкового препарата, содержащего токсин-корегулируемые пили адгезии 1 – маркер молекулярной массы – 17,8 кДа; 2 – белковый препарат из V. cholerae КМ206; 3 – общая белковая фракция штамма V. cholerae КМ206 помимо специфических антител к антигенам С или В, содержали антитела к общему антигену А, то на следующем этапе была проведена работа по их удалению
Proposed is the method for simultaneous isolation and purification of three cholera vibrio key pathogenicity factors (cholera toxin, toxin-co-regulated adhesion pili, O1 antigen Ogawa or Inaba), which are main protective antigens, from previously constructed recombinant Vibrio cholerae strains 2415 Inaba and KM 206 Ogawa
Summary
В работе использованы следующие сконструированные ранее рекомбинантные штаммы V. cholerae: 2415, классический биовар, О1-серогруппа серовара Инаба, содержащий рекомбинантную плазмиду pCT105::mini-kan (KmR, TcR) c клонированными структурными генами ctxAB, кодирующими ХТ [12]; КМ 206 (2416), классический биовар, О1-серогруппа. Препараты О-антигена О1 серогруппы сероваров Инаба и Огава получали с помощью поэтапного выделения растворенного в культуральной среде антигена. Специфическую активность очищенных антигенов определяли в реакции иммунодиффузии в геле (РИД) [3]. Изучение белкового состава выделенных и очищенных протективных антигенов проводили, используя электрофорез в полиакриламидном геле [9]. Кроличьи антисыворотки к выделенным и очищенным препаратам протективных антигенов (ХТ, ТКПА, О1-антигену сероваров Инаба и Огава) получали с помощью модифицированных нами методов иммунизации [5, 7, 13]. Антисыворотку к О1-антигену сероваров Инаба и Огава получали путем 3-кратной иммунизации кроликов с интервалами в 4 дня нарастающими дозами антигена (50, 100, 150 мкг). Антисыворотку к ТКПА получали 4-кратной внутривенной иммунизацией возрастающими дозами антигена (100, 150, 200 и 250 мкг) с интервалом в 7 дней. Антигенную активность полученных сывороток определяли в РИД с соответствующими очищенными препаратами антигенов
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
