Rapid identification of Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococci by fluorescent in situ hybridization

Abstract

目的 建立一种新的荧光原位杂交法,快速鉴定血培养中的金黄色葡萄球菌(金葡菌)和凝固酶阴性葡萄球菌.方法将荧光同位素标记的针对金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的核糖体16SrRNA序列的互补的DNA寡核苷酸探针,在同一张玻片上50℃杂交1 h,用杂交缓冲液50℃洗涤10min,干燥后置荧光显微镜下观察,全过程大约2 h.结果探针的特异性经标准菌株和临床分离菌株证实.将259份临床标本测试与培养法比较,金葡菌的特异性和敏感性均为100%,CoNs的特异性和敏感性分别为100%和95.5%,荧光原位杂交法的最低检出限为103 CFU/ml.结论本方法适用于血培养中的金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的快速鉴定。