QUANTIFICATION OF ORGANIC ACIDS IN GRAPE MUSTS AND PORT WINESCUANTIFICACIÓN DE ÁCIDOS ORGÁNICOS EN MOSTOS Y VINOS DE OPORTOCUANTIFICACIÓN DE ÁCIDOS ORGÁNICOS EN MOSTOS E VIÑOS DE PORTO

Abstract

A simple, rapid and accurate method for derivatization and quantitative HPLC analysis of organic acids, was optimised in order to provide the determination of the most important acids found in Port wines and grape musts used for their elaboration. The method was based on the use of O-(4-nitrobenzyl)-N,N′-diisopropylisourea (NBDI) as derivatizing reagent. Samples were primarily treated 15 min with a strong cation-exchange resin (Dowex 50W-X8) to free the organic acids. HPLC determination was accomplished by using a RP-18 (3 μm) column, a mobile phase composed of water and acetonitrile (non-linear gradient) at a flow-rate of 1 mL min−1, and a UV detector set at 265 nm. Sensitive and well-resolved peaks were obtained from the main organic acids (lactic, acetic, succinic, tartaric, malic and citric acids) in less than 30 min, either with Port wines or grape musts. Benzylmalonic acid was used as internal standard. Precision and recovery assays were performed with good results for all of 6 acids considered. The major differences between grape musts and Port wines were the greater overall amounts of organic acids in the former and the higher content of lactic, acetic and succinic acids in the latter. © 2002 Altaga. All rights reserved. Resumen Se optimizó un simple, rápido y exacto método para la derivatización y análisis por HPLC de ácidos orgánicos, con el objeto de permitir la determinación de los principales ácidos encontrados en mostos y vinos de Oporto. El método se basa en el uso de O-(4-nitrobenzil)-N,N′-diisopropilisourea (NBDI) como agente de derivatización. Las muestras se pasaron en primer lugar por una resina de intercambio catiónico fuerte (Dowex 50W-X8) durante 15 min para liberar los ácidos orgánicos. La determinación por HPLC se desarrolló usando una columna RP-18 (3 μm), una fase móvil compuesta de agua y acetonitrilo (gradiente no-lineal) con un caudal de 1 mL min−1. Se usó un detector UV ajustado a 265 nm. Analizando muestras de mostos y vinos de Oporto se obtuvieron picos resueltos de los principales ácidos orgánicos (ácido láctico, acético, succinico, tartárico, málico y cítrico) en menos de 30 min. Se usó como patrón interno ácido benzilmalónico. Los ensayos de precisión y recuperación se realizaron con buenos resultados para los 6 ácidos considerados. La mayor diferencia entre los mostos y vinos de Oporto fue la mayor cantidad global de ácidos organicos en el primero y de ácido láctico, acético y succinico en el segundo. © 2002 Altaga. Todos los derechos reservados. Palabras clave: Vinos de Oporto, ácidos orgánicos, HPLC. Resumo Optimizouse un simple, rápido e exacto método para a derivatización e análise por HPLC de ácidos orgánicos, co obxecto de permiti-la determinación dos principais ácidos atopados nos mostos e viños de Porto. O método basease no uso de O-(4-nitrobenzil)-N,N′-diisopropilisourea (NBDI) como axente de derivatización. As mostras pasáronse nun primeiro lugar por unha resina de intercambio catiónico forte (Dowex 50W-X8) durante 15 min para libera-los ácidos orgánicos. A determinación por HPLC desenvolveuse usando unha columna RP-18 (3 μm), unha fase móbil composta de auga e acetonitrilo (gradiente non-lineal) cun caudal de 1 mL min−1. Usouse un detector UV axustado a 265 nm. Analizando mostras de mostos e viños de Porto obtivéronse picos resoltos dos principais ácidos orgánicos (ácido láctico, acético, succínico, tartárico, málico e cítrico) en menos de 30 min. Usouse como patrón interno ácido benzilmalónico. Os ensaios de precisión e recuperación realizáronse con bos resultados para os 6 ácidos considerados. A maior diferencia entre os mostos e viños de Porto foi a maior cantidade global de ácidos orgánicos nos primeiros e de ácido láctico, acético e succínico nos segundos. © 2002 Altaga. Tódolos dereitos reservados. Palabras chave: Viños de Porto, ácidos orgánicos, HPLC.