Quantificação de antígenos HLA classe I solúveis pela técnica de ELISA

Sueli Donizete Borelli,Marciele Coan Boian,Renato Marques De Andrade,Lílian Yurie Nakamura,Elisiane Coan Boian,André Luiz Medeiros

doi:10.4025/actascihealthsci.v31i2.6758

Abstract

HLA ( Human Leucocyte Antigens ) molecules are regarded mainly as cell surface structures involved in several immune reactions associated with transplants, infections and auto-immune diseases. HLA antigens can be also found in soluble form in serum and in different fluids of the human body. The aim of this work was to develop the immunoenzymatic assay (ELISA) to quantify serum levels of specific and total soluble HLA class I antigens in normal individuals and in kidney patients. ELISA assay was developed to demonstrate the presence, in serum, of HLA-A2 (sHLA-A2), HLA-B7 (sHLA-B7) and total class I (sHLA-I) antigens. Eighty-eight serum samples were involved in this study, 61 from healthy individuals registered in the Regional Blood Center of the city of Maringa, Parana State, and 27 kidney patients from dialysis centers of Maringa. The mean concentrations of sHLA-A2 and sHLA-B7, in healthy individuals, were respectively, 504.06 ng mL -1 ±142.10 and 427.33 ng mL -1 ±140.73. Preliminary results showed that sHLA-I in healthy individuals was 253.77 ng mL -1 , and 381.67 ng mL -1 in kidney dialysis patients. The ELISA assay could be useful to detect soluble HLA antigens in comparative studies in different healthy populations, in several pathologies and in monitoring rejection in transplantation.

Highlights

O Complexo Principal de Histocompatibilidade (CPH ou MHC, do inglês, Major Histocompatibility Complex) consiste em um conjunto de genes situado no braço curto do cromossomo 6 humano
Tanto as moléculas classe I quanto as moléculas classe II participam da resposta imune como apresentadoras de peptídeos aos receptores de superfície dos linfócitos T (PAMER; CRESSWELL, 1998)
Por estarem presentes em todas as células do organismo, tais moléculas funcionam como aloantígenos

Summary

Quantificação de antígenos HLA classe I solúveis pela técnica de ELISA

Elisiane Coan Boian, Renato Marques de Andrade, Lílian Yurie Nakamura, André Luiz Medeiros, Marciele Coan Boian e Sueli Donizete Borelli*. Este trabalho teve como objetivo desenvolver a técnica imunoenzimática (ELISA) para quantificar os níveis séricos de antígenos HLA classe I, específicos e totais, em indivíduos normais e em pacientes renais. A técnica de ELISA foi desenvolvida para demonstrar a presença, no soro, de antígenos HLA classe I totais (sHLAI) e as especificidades HLA-A2 (sHLA-A2) e HLA-B7 (sHLA-B7). Oitenta e oito amostras de soro foram envolvidas neste estudo, sendo 61 amostras provenientes de indivíduos sadios cadastrados no Hemocentro Regional de Maringá, Estado do Paraná, e 27 pacientes renais, provenientes dos centros de diálise da cidade de Maringá, Estado do Paraná. A técnica de ELISA para detecção de antígenos HLA solúveis poderá ser útil em estudos comparativos, em diferentes populações saudáveis, diferentes patologias e no monitoramento das rejeições em transplantes.

Casuística Indivíduos saudáveis

Reação de ELISA para detecção de sHLA

Resultados e discussão