Abstract

Justified is the possibility of application of fixed rabies virus Moscow 3253, reproduced on the cell culture Vero, as an antigen for heterologous anti-rabies immunoglobulin production. Application of the adjuvant - aluminium hydrate - is determined to be effective. Herein, by the day 73 post immunization, specific antibodies titer is ≥ 1:500 (wherein specific activity has been identified by means of neutralization test, carried out on white mice, and dot-blot immunoassay). The level of specific activity in experimental samples of anti-rabies immunoglobulin, isolated from rabbit immune serum, corresponds to 332 and 347 ME/ml. Physicochemical and biological properties of anti-rabies immunoglobulin, produced with the help of cultural antigen, fully comply with regulatory requirements specified for commercial preparation of heterologous anti-rabies immunoglobulin.

Highlights

  • Justified is the possibility of application of fixed rabies virus “Moscow 3253”, reproduced on the cell culture Vero, as an antigen for heterologous anti-rabies immunoglobulin production

  • Physicochemical and biological properties of anti-rabies immunoglobulin, produced with the help of cultural antigen, fully comply with regulatory requirements specified for commercial preparation of heterologous anti-rabies immunoglobulin

  • [Activity test for anti-rabies sera and heterologous anti-rabies immunoglobulin preparation in vitro using dot-blot immunoassay]

Read more

Summary

Материалы и методы

Фиксированный вирус бешенства (штамм «Москва 3253») выращивали на перевиваемой клеточной линии Vero суспензионным методом с использованием биореактора BioG-M Plus («BioTron», Корея) вместимостью 5 л. Для культивирования клеток Vero использовали среду Игла МЕМ с 10 % содержанием сыворотки крупного рогатого скота («Биолот», Россия); вируса бешенства – среду 199 («Биолот», Россия) с содержанием человеческого сывороточного альбумина 0,1 % и антибиотиков (пенициллин – 100 ЕД/мл, стрептомицин 0,1 мг/мл). Удаление клеточного дебриса осуществляли предварительным осаждением и фильтрацией жидкости через ацетатцеллюлозные фильтры с диаметром пор 0,45 и 0,2 мкм. Для получения высокоочищенного раствора иммуноглобулина проводили предварительную фильтрацию через ацетатцеллюлозные фильтры с диаметром пор 0,8 и 0,45 мкм. Для улучшения показателей цветности и прозрачности осуществляли фильтрацию через глубинные фильтры Zeta Plus («CUNO», Франция). Для стерилизации жидкого раствора иммуноглобулина осуществляли его фильтрацию через фильтры с диаметром пор 0,22 мкм. Специфическую активность антирабической сыворотки и иммуноглобулина определяли in vitro в дот-иммуноанализе [8] и in vivo в реакции нейтрализации вируса бешенства на белых мышах [13]. Статистический анализ полученных результатов проводили по общепринятым методам [1]

Результаты и обсуждение
Электрофоретическая чистота
СПИСОК ЛитературЫ
Full Text
Paper version not known

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call