Abstract
Chloramphenicol (CAP) is a broad-spectrum antibiotic of high toxicity on human therefore it is being strictly controlled in food. We are interested in the development of a method of effective extraction of CAP in food based on the immunological principle using specific anti-CAP antibody combining with LC/MS/MS for the analysis of the residual CAP in food meeting the international standard. In this article, we reported experimental results on the preparation of anti-CAP rabbit antibody. Conjugative antigen between CAP and the carrier protein, bovine serum albumin, BSA (CAP-BSA) was successfully synthesized from chloramphenicol succinate and BSA with a BSA conjugating efficiency of more than 70 %, and the presence of CAP in the conjugative antigen was confirmed by ELISA method. The CAP-BSA antigen could cause good immune response in rabbit by the first antigen injection and induce the increasing production of anti-CAP antibody in rabbit serum from the third antigen injection which reached maximal value after the fifth injection. Anti-CAP antibody was purified from rabbit anti-serum in two steps: i) Removing of albumin and other non antibody proteins by 35–37 % saturated ammonium sulphate; ii) Elimination of anti-BSA antibody by the Sepharose-BSA specific affinity chromatography column. The ability of the purified anti-CAP antibody to interact and bind with CAP molecules in CAP-spiked sample was proved using a Sepharose-Anti-CAP antibody chromatography column which was made by conjugating the purified anti-CAP antibody with Sepharose beads.
Highlights
Chloramphenicol (CAP) is a broad-spectrum antibiotic of high toxicity on human it is being strictly controlled in food
We are interested in the development of a method of effective extraction of CAP in food based on the immunological principle using specific anti-CAP antibody combining with LC/MS/MS for the analysis of the residual CAP in food meeting the international standard
We reported experimental results on the preparation of antiCAP rabbit antibody
Summary
Chloramphenicol (CAP) là một kháng sinh Kháng nguyên CAP-BSA đã gây đáp ứng miễn phổ rộng có độc tính cao, ảnh hưởng xấu đến sức dịch tốt ở thỏ tạo kháng thể kháng BSA từ lần tiêm khỏe con người nên cần được kiểm soát chặt chẽ kháng nguyên đầu tiên và cảm ứng sự hình thành trong thực phẩm. Chúng tôi quan tâm đến việc kháng thể kháng CAP trong huyết thanh thỏ tăng phát triển một phương pháp chiết tách hiệu quả dần từ lần tiêm kháng nguyên thứ ba trở đi, đạt CAP từ thực phẩm dựa trên nguyên tắc miễn dịch cao nhất sau lần tiêm kháng nguyên thứ năm. Sử dụng kháng thể kháng chuyên biệt CAP để kết Kháng thể kháng CAP được tinh chế từ kháng hợp với phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ huyết thanh thỏ bằng hai bước: i) Loại bỏ albumin LC/MS/MS nhằm phục vụ việc phân tích xác định cùng các protein không là kháng thể bằng tồn dư CAP trong thực phẩm đạt yêu cầu của các ammonium sulfate 35–37 % bão hòa; ii) Loại bỏ tiêu chuẩn quốc tế. Kháng nguyên cộng hợp và gắn chuyên biệt CAP hiện diện trong dung dịch giữa CAP và protein mang, bovine serum albumin, mẫu chứa CAP của kháng thể kháng CAP tinh chế BSA (kháng nguyên CAP-BSA), đã được tổng hợp đã được chứng minh bằng cột sắc ký miễn dịch thành công từ chloramphenicol succinate và BSA Sepharose-Kháng thể kháng CAP được tạo thành với hiệu suất cộng hợp BSA lớn hơn 70 % và sự bằng cách cộng hợp kháng thể kháng CAP tinh chế hiện diện của CAP trong kháng nguyên cộng hợp với Sepharose. được kiểm chứng bằng phương pháp ELISA
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a call
