Preparation of (99m)Tc-EDTA-MN and Its Bioimaging in Mouse

Abstract

背景与目的乏氧是实体肿瘤的一个重要生物学特征，组织乏氧导致肿瘤对放疗和化疗不敏感，从而增加其对放化疗的抵抗性，因此确定肿瘤组织乏氧程度具有重要意义。核医学乏氧显像能够反映肿瘤组织乏氧程度，他能选择性地滞留在乏氧细胞或组织中，主要包括硝基咪唑类和非硝基咪唑类；其中硝基咪唑类肿瘤乏氧细胞显像剂是国内外研究的较多并且具有发展前景的一类用于肿瘤治疗的药物。本研究应用放射性核素标记技术对研制具有临床应用价值的肿瘤乏氧显像剂乙二胺四乙酸-甲硝唑酯(ethylenediaminetetraacetic acid-metronidazole, EDTA-MN)配体进行标记。探讨采用氯化亚锡还原法法进行99mTc标记的可行性，评价99mTc-EDTA-MN的放化特性，观察99mTc-EDTA-MN在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)裸鼠模型体内的生物学分布特点，为其进一步研究与应用提供实验依据。方法采用氯化亚锡还原法进行EDTA-MN配体的99mTc标记，分别对反应量(10 mg、5 mg、2 mg)、氯化亚锡用量(8 mg/mL、4 mg/mL、2 mg/mL)、标记体系pH(2、4、5、6)逐一进行试验，采用正交试验设计进行分析，以寻找最佳标记条件。采用纸层析法和高效液相色谱法测定标记率、放化纯度、脂水分配系数及室温下在生理盐水的体外稳定性，并对标记物在裸鼠体内的生物学分布进行初步显像研究。结果最佳标记条件下的标记率(84.11±2.83)%，放射化学纯度大于90%，室温下放置12 h在生理盐水中较稳定。脂水分配系数为lgP=-3.05。尾静脉注射99mTc-EDTA-MN的3 h内，裸鼠肿瘤模型初步显像示0.5 h时膀胱区域见大量放射性浓聚，1 h时肿瘤显影清晰，其余脏器内放射性分布均较低。采用ROI技术测得0.5 h、1 h、2 h、3 h肿瘤部位单位面积内放射性计数(88.14±11.59)、(123.17±9.06)、(98.08±14.40)和(79.87±10.57)，并计算肿瘤与肝脏区域的T/NT比值分别为(1.95±0.19)、(3.58±0.78)、(3.95±0.39)和(5.01±0.28)。结论99mTc-EDTA-MN易于制备具有比较理想的体内分布动力学特性，可满足后续进一步的体内、外实验研究。