Abstract
O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma PCR em tempo real (qPCR) para o diagnóstico rápido e sensível da doença de Aujeszky. Os iniciadores amplificaram um fragmento de 123 pares de base do gene codificante da glicoproteína D. A qPCR foi testada em 25 amostras de cérebro de suíno positivas e 85 amostras negativas para DA no isolamento viral e na soroneutralização. A sensibilidade analítica foi calculada com acréscimo de um isolado brasileiro do SuHV-1 titulado em amostras de cérebro de suíno negativas na soroneutralização e na PCR. A técnica apresentou sensibilidade analítica de 10-0,5 TCID50/50µL. A qPCR foi capaz de distinguir reações inespecíficas devido a dímero de oligonucleotídeos iniciadores ou amplificações, além do alvo designado (evitando, assim, os falso-positivos), e de obter resultados rápidos.
Highlights
A doença de Aujeszky (DA) ou pseudorraiva é uma enfermidade de grande importância na suinocultura (OIE, 2009)
a 123 base pairs fragment of the gene coding for glycoprotein D. PCR was tested on
The detection limit was calculated on samples of pig brain contaminated with a Brazilian isolate
Summary
A doença de Aujeszky (DA) ou pseudorraiva é uma enfermidade de grande importância na suinocultura (OIE, 2009). As atuais metodologias de diagnóstico, como, por exemplo, o isolamento e a neutralização viral, são específicas e muito utilizadas nos laboratórios, mas contam com determinados problemas que podem comprometer a velocidade das análises ou mesmo os resultados.
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