Abstract

Inulinase was produced from local isolate of Aspergillus niger J3. The inulinase was purified by two steps included precipitation by amonium sulphate at (30-80) % sa-turation and gel filtration on sephadex G100. The final purification folds and the yield of the enzyme were 3.15 times and 28.24%, respectively. The purified enzyme has the following characteristics: The optimum pH of the enzyme activity was 5.5. The enzyme was most stable at pH (4.5 - 6). The optimum temperature for its activity was 45c. The enzyme retained its original activity when incubates at (30-55) c for 20 minutes. Mercury chloride inhibited the enzyme completely at concentration of 10mM, cupper sulphate and calisium chloride inhibited the enzyme at concentrations of 85% and 7% respectively. It was revealed that the enzyme had the efficiency to hydrolyze 87% of 5% inulin solution when treated at 45c for 120 min.

Highlights

  • ‫المستخلص‬ ‫انتج انزيم الانيولينيز من العزلة المحلية للعفن ‪ Aspergillus niger J3‬وتم تنقيته بخطوتين شملت‬ ‫الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة اشباع )‪ %(80- 30‬ومن ثم الترشيح الھلامي في ‪sephadex G100‬‬ ‫وبلغت عدد مرات التنقية بعد ھذة الخطوات ‪ 3.75‬مرة وبحصيلة انزيمية مقدارھا ‪ . %33.65‬وقد بينت نتائج‬ ‫توصيف الانزيم بان الرقم الھيدروجيني الامثل لفعالية الانزيم ‪ 5.5‬وتراوح الرقم الھيدروجيني الامثل لثبات‬ ‫الانزيم بين ) ‪ (6-4.5‬ووجد ان درجة الحرارة المثلى للفعالية تبلغ ‪45‬م واحتفظ الانزيم بكامل فعاليته عند‬ ‫حضنه مدة ‪ 20‬دقيقة في مدى من الدرجات الحرارية تراوح )‪(55- 30‬م ‪ .‬ثبط كلوريد الزئبق فعالية الانزيم‬ ‫بالكامل عند التركيز ‪ 10‬ملي مولاري في حين ثبطت كبريتات النحاس و كلوريد الكالسيوم فعالية الانزيم بنسبة‬ ‫) ‪ %(7 , 85‬على التوالي عند نفس التركيز ‪ .‬تميز مستخلص الانزيم بكفاءة لتحليل محلول الانيولين بتركيز‬.

  • ‫ويذكر إن الخطوات المستخدمة لتنقية الإنزيم في المراجع العلمية على درجات عالية من التنوع فقد استخدم ]‪[5‬‬ ‫التركيز بكبريتات الامونيوم لتنقية الانزيم المنتج من ‪ Aspergillus niveus‬ومن ثم عمود ‪ DE-52‬وبعد ذلك‬ ‫‪ sephadex G-75‬وكان عدد مرات التنقية بعد ھذة الخطوات ‪ 34.65‬وبحصيلة انزيمية ‪ %53.63‬كذلك‬ ‫استخدم ]‪ [12‬كبريتات الامونيوم بالخطوة الاولى ومن ثم عمود ‪ DEAEcellulose‬واخيرا ‪sephadex-‬‬

  • ‫تم حضن إنزيم الانيولينيز المنتج من ‪ Aspergillus niger J3‬بدرجات حرارية تراوحت بين )‪ (70-30‬م مدة‬ ‫‪ 20‬دقيقة وبرقم ھيدروجيني )‪ ( 5‬ويظھر شكل )‪

Read more

Summary

Introduction

‫المستخلص‬ ‫انتج انزيم الانيولينيز من العزلة المحلية للعفن ‪ Aspergillus niger J3‬وتم تنقيته بخطوتين شملت‬ ‫الترسيب بكبريتات الامونيوم بنسبة اشباع )‪ %(80- 30‬ومن ثم الترشيح الھلامي في ‪sephadex G100‬‬ ‫وبلغت عدد مرات التنقية بعد ھذة الخطوات ‪ 3.75‬مرة وبحصيلة انزيمية مقدارھا ‪ . %33.65‬وقد بينت نتائج‬ ‫توصيف الانزيم بان الرقم الھيدروجيني الامثل لفعالية الانزيم ‪ 5.5‬وتراوح الرقم الھيدروجيني الامثل لثبات‬ ‫الانزيم بين ) ‪ (6-4.5‬ووجد ان درجة الحرارة المثلى للفعالية تبلغ ‪45‬م واحتفظ الانزيم بكامل فعاليته عند‬ ‫حضنه مدة ‪ 20‬دقيقة في مدى من الدرجات الحرارية تراوح )‪(55- 30‬م ‪ .‬ثبط كلوريد الزئبق فعالية الانزيم‬ ‫بالكامل عند التركيز ‪ 10‬ملي مولاري في حين ثبطت كبريتات النحاس و كلوريد الكالسيوم فعالية الانزيم بنسبة‬ ‫) ‪ %(7 , 85‬على التوالي عند نفس التركيز ‪ .‬تميز مستخلص الانزيم بكفاءة لتحليل محلول الانيولين بتركيز‬. ‫ويذكر إن الخطوات المستخدمة لتنقية الإنزيم في المراجع العلمية على درجات عالية من التنوع فقد استخدم ]‪[5‬‬ ‫التركيز بكبريتات الامونيوم لتنقية الانزيم المنتج من ‪ Aspergillus niveus‬ومن ثم عمود ‪ DE-52‬وبعد ذلك‬ ‫‪ sephadex G-75‬وكان عدد مرات التنقية بعد ھذة الخطوات ‪ 34.65‬وبحصيلة انزيمية ‪ %53.63‬كذلك‬ ‫استخدم ]‪ [12‬كبريتات الامونيوم بالخطوة الاولى ومن ثم عمود ‪ DEAEcellulose‬واخيرا ‪sephadex-‬‬

Results
Conclusion

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call

Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.