Abstract
Este trabalho teve como objetivo otimizar e validar uma metodologia analítica para determinação de 1-hidróxipireno em urina de trabalhadores envolvidos na colheita da cana-de-açúcar. O método utilizado para determinação de 1-hidroxipireno em urina humana utilizado consiste na hidrólise enzimática, extração e clean-up por extração em fase sólida (SPE) e quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de fluorescência (CLAE/Flu). Quatro tipos de cartuchos foram testados para verificação da porcentagem de recuperação. Urina de cortadores de cana-de-açúcar (não-fumantes e de ambos os sexos) foram coletadas no período da safra (n=39) e entressafra (n=34) da cana-de-açúcar. Os melhores resultados de recuperação foram atribuídos aos cartuchos C18. Os mesmos apresentaram recuperação entre 79% e 108%, com coeficiente de variação entre 5% e 10%. O limite de quantificação do método foi de 74 ng de 1-hidroxipireno por litro de urina. A metodologia otimizada e validada foi utilizada para determinação de amostras reais. Os resultados encontrados na urina dos trabalhadores no período da safra variaram de 0,026 a 2,3 μmol de 1-hidroxipireno por mol de creatinina. No período da entressafra os resultados variaram de 0,0023 a 0,38 μmol de 1-hidroxipireno por mol de creatinina. A metodologia validada mostrou-se adequada para determinação de 1-hidroxipireno em urina humana. Os dados obtidos permitem concluir que há forte correlação entre excreção de 1-hidroxipireno e os períodos de safra e entressafra da cana de açúcar.
Highlights
This study aimed to optimize and validate an analytical methodology for determination of 1hydroxypyrene in urine of workers involved in harvesting sugar cane
Four types of cartridges were tested to verify the percentage of recovery
The results found in the urine of workers at harvest period ranged from 0.026 to 2.3 mol of 1hydroxypyrene per mol creatinine
Summary
Estima-se que sua contribuição mundial esteja na ordem de 104 Tg/ano [2,6]. Dentre as várias substâncias liberadas pela combustão da palha da cana de açúcar, encontram-se os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) [7]. Os HPAs constituem uma família de compostos caracterizada por possuírem 2 ou mais anéis aromáticos condensados [8,9]. O pireno é quase exclusivamente metabolizado em 1hidroxipireno (1-OHP) (Etapa 1) e depois sofre uma conjugação com ácido glucurônico ou sulfato (Etapa 2). Livre ou conjugado, o 1hidróxipireno é eliminado pelo organismo através da urina [11]. As estruturas química do pireno, 1-OHP e do 1-OHP conjugado com ácido glucurônico são mostradas na Figura 1. O 1-OHP, foi introduzido como biomarcador de exposição por Jongeneelen e colaboradores [12]. Foi desenvolvido um método que vem sendo utilizado em vários estudos envolvendo exposição ocupacional. Uma metodologia analítica foi otimizada e validada com o objetivo de determinar 1-OHP em urina de cortadores de canade-açúcar da região de Araraquara/SP. Os cartuchos de SPE utilizados foram: Absolut NEXUS, 60mg (Varian, Harbor City, USA); Sep Pak C18, 360 mg (Waters, Milford, Massachusetts); Supelco C18, 1000 mg (Supelco, Bellefonte, USA); Bond Elut C18, 200 mg (Varian, Harbor City, USA)
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