MiR-30b-3p Inhibits the Proliferation and Invasion of Lung Adenocarcinoma by Targeting COX6B1

Abstract

背景与目的肺腺癌（lung adenocarcinoma, LUAD）是当前最常见的肺癌亚型，微小RNA（microRNAs, miRNAs）是一类非编码小RNA，在细胞活动中发挥核心作用。miR-30b-3p在许多类型的癌症中均起到了关键作用，但关于其在肺腺癌中如何发挥作用的研究仍然很少。本研究通过探索miR-30b-3p在肺腺癌增殖和侵袭中的作用和机制，以期为临床上抑制肺腺癌的增殖和侵袭拓展新的方向。方法利用NCBI生物数据库查找肺腺癌中差异表达明显的miRNA，并查询其差异表达及生存曲线；采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR）检测miR-30b-3p在各肺腺癌细胞系中的表达；5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2'-deoxyuridine, EdU）细胞增殖实验和Transwell实验检测各组A549细胞增殖和侵袭能力的变化；使用在线预测数据网站确定miR-30b-3p的靶蛋白；Western blot验证COX6B1在不同组肺腺癌细胞中的表达情况；双荧光素酶实验证实miR-30b-3p与COX6B1是否存在结合位点。结果miR-30b-3p在肺腺癌组织和细胞中表达下调（P<0.05），低表达水平的miR-30b-3p与肺腺癌患者的不良预后有关（P=0.005,8）；过表达miR-30b-3p能够抑制肺腺癌细胞的增殖与侵袭能力（P<0.05）；双荧光素酶实验证明miR-30b-3p和COX6B1存在结合位点（P<0.05）；Western blot实验表明在肺腺癌细胞A549中，过表达miR-30b-3p能够下调COX6B1的表达（P<0.05）；EdU细胞增殖实验和Transwell侵袭实验表明，miR-30b-3p的过表达能够逆转上调COX6B1对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的促进作用（P<0.05）。结论miR-30b-3p在肺腺癌中起到了抑癌基因的作用，并能够通过调控COX6B1的表达来抑制肺腺癌的增殖和侵袭。