MiR-665 Promotes the Biological Behavior of Small Cell Lung Cancer by Targeting LLGL1

Abstract

背景与目的MicroRNAs（miRNAs）是一种广泛存在于真核生物体中的非编码小分子RNA，尽管一些miRNA在肿瘤中作用已被发现，但是miR-665对小细胞肺癌的中的表达及影响还尚不清楚。本研究旨在分析miR-665对肺癌细胞增殖、周期、侵袭和迁移的影响，探讨miR-665在小细胞肺癌中发挥的作用及其工作机制。方法qRT-PCR检测miR-665在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达水平；TargetScan预测miR-665的潜在靶基因并用双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot进行验证；免疫组化、qRT-PCR和Western blot检测LLGL1在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达水平；CCK8法、流式细胞法、Transwell和细胞划痕实验检测miR-665和LLGL1对肺癌细胞NCI-H446、NCI-H1688增殖、侵袭、迁移以及S期细胞比值的影响；构建肺癌裸鼠移植瘤模型并观察miR-665对小鼠肿瘤生长的影响。结果miR-665在肺癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织；miR-665能靶向作用于LLGL1的3’-UTR并抑制其表达；相比于癌旁正常组织，LLGL1在肺癌组织中的表达水平明显降低；抑制miR-665的表达可以抑制肺癌NCI-H446细胞的增殖、S期细胞比值、侵袭和迁移能力，而干扰LLGL1能逆转这种抑制效果；上调miR-665则促进肺癌NCI-H1688的增殖、S期细胞比值、侵袭和迁移能力，但这种促进效果同样被LLGL1的过表达逆转；在肺癌裸鼠移植瘤模型中，抑制miR-665能上调LLGL1蛋白的表达并抑制肿瘤的生长，而上调miR-665的表达则可以产生相反的结果。结论miR-665表达水平的变化与肺癌密切相关，miR-665可以通过抑制其靶基因LLGL1的表达促进肺癌细胞的生物学行为，在小细胞肺癌中发挥促癌基因的作用。