MiR-145 inhibits lung adenocarcinoma stem cells proliferation by targeting OCT4 gene

Abstract

背景与目的miR-145是通过miRNA芯片及qPCR验证筛选出的一种潜在肺癌“保护性”miRNA。本研究旨在探讨miR-145与肺癌干细胞之间的关系及分子机制。方法miRNA芯片对肺腺癌患者瘤旁和正常组织进行表达谱分析；生物信息学软件预测miR-145潜在的靶基因；脂质体2000介导转染miR-145模拟物和阻遏物进入A549细胞株；实时定量PCR检测miR-145表达水平；Western blot检测OCT4蛋白水平；双荧光素酶报告基因验证miR-145是否作用于OCT4 mRNA的3’UTR区预测靶位；细胞增殖实验检测miR-145对于A549细胞生长的作用；流式细胞术检测干细胞表型CD133+的表达。结果在肺腺癌组织中miR-145表达明显低于瘤旁正常组织；miRanda软件预测OCT4是miR-145潜在靶基因；与对照组相比，miR-145模拟物组和阻遏物组miR-145表达分别明显上调和下调；miR-145对A549细胞的生长有双向调节作用，过表达miR-145抑制细胞生长；过表达miR-145可明显降低OCT4蛋白水平及干细胞表型CD133百分比，而抑制miR-145表达则明显增加OCT4蛋白水平及CD133百分比。双荧光素酶报告基因检测证明miR-145可作用于OCT4 mRNA的3’UTR区预测靶位。结论miR-145可通过下调OCT4基因表达抑制A549肺腺癌细胞株中干细胞的增殖，是一种潜在的肺癌“保护性”miRNA。