Mécanisme de régulation de l'α-acétohydroxyacide-synthétase chez Bacillus cereus T

Abstract

This investigation is concerned with α-acetohydroxyacid synthetase properties in Bacillus cereus T. According to the results, there is only one enzymatic α-acetolactate forming system, operating at pH 7,5. The enzyme is sensitive, in vitro, to valine leucine and isoleucine inhibition, the partial inhibitions of leucine and isoleucine being additive and equal to the maximum inhibition caused by valine alone. The kinetic constants are Km = 2.10−3 M with respect to pyruvate and Ki = 7.10−5 M for valine. A mixed V and K inhibition system for this enzyme is suggested by the kinetic of inhibition. Cette étude est relative aux propriétés, in vitro, de l'α-acétohydroxyacide-synthétase de Bacillus cereus T; il n'existe qu'un seul système enzymatique formant l'α-acétolactate et fonctionnant à pH 7,5. L'enzyme est inhibé in vitro par la valine, par la leucine et par l'isoleucine. Les inhibitions partielles exercées par la leucine et par l'isoleucine sont additives et, lorsqu'elles sont associées, atteignent en présence comme en l'absence de valine l'inhibition maximale obtenue avec la valine seule. La cinétique enzymatique a permis de déterminer les valeurs Km = 2.10−3 M vis-à-vis du pyruvate et Ki = 7.10−5 M pour la valine. Enfin, la cinétique d'inhibition suggère que l'on est en présence d'un système ou s'exerce une influence sur les deux constantes d'affinité (K) et de vitesse (V). Wir untersuchen hier in vitro die Eigenschaften der α-Acctohydroxysäure-Synthetase von Bacillus cereus T. Es besteht nur ein einziges Enzymsystem, welches das α-Acetolactat bildet und bei pH 7,5 funktioniert. Das Enzym wird in vitro durch das Valin, das Leucin und das Isoleucin inhibiert. Die durch das Leucin und das Isoleucin ausgeübten Teilinhibitionen sind additiv und erreichen zusammen in Gegenwart sowie in Abwesenheit von Valin die Maximum-Inhibition, welche mit dem Valin allein erhalten wird. Die kinetischen Konstanten sind Km = 2.10−3 M in Bezug auf das Pyruvat und K1 = 7.10−5 M für das Valin. Endlich bringt die kinetische Untersuchung der Inhibition auf den Gedanken, dass die beiden Konstanten, K (Affinität) und V (Geschwindigkeit), beeinflusst werden.