Localization of fungal fimbriae by immunocytochemistry in pathogenic and nonpathogenic isolates of <i>Venturia inaequalis</i>

Abstract

Des isolats pathogenes et non pathogenes de Venturia inaequalis ont ete cultives en milieu liquide. Les hyphes ont ete mis en contact avec deux types d'antiserum contre les fimbriae (AU- et AV-1) et observes en microscopie a fluorescence pour determiner la distribution des epitopes des fimbriae a partir de frottis de cellules entieres. L'antiserum AV-1 etait specifique aux sous-unites glycoproteiques alors que l'antiserum AU- etait specifique aux moities proteiques presentes sur les fimbriae de Mycobactryum violaceum. L'utilisation d'un serum antifimbriae en immunocytochimie et en microscopie electronique a transmission a revele une distinction nette entre les isolats pathogenes et non pathogenes de V inaequalis en se basant sur l'apparence de la paroi cellulaire du champignon et sur la distribution des epitopes des fimbriae marques avec l'antiserum AV-1 et un complexe or-immunoglobuline. Chez les hyphes en croissance active de l'isolat pathogene, caracterises par des organelles cellulaires distinctes, des petites vacuoles et des corps lipidiques, les epitopes des fimbriae etaient concentres dans la paroi cellulaire du champignon et on en retrouvait un minimum a la surface externe. Par contre avec les hyphes en croissance active de l'isolat de V inaequalis non pathogene, on notait des protuberances importantes ressemblant a des cheveux fins dans la paroi cellulaire du champignon qui reagissaient avec l'antiserum AV-1 et le complexe or-immunoglobuline. Chez V inaequalis, la distribution des epitopes des fimbriae dependait fortement du stade de developpement du mycelium fongique. Chez les isolats pathogenes ou non pathogenes, les myceliums âges se caracterisaient par des grosses vacuoles centrales et ne presentaient pas de marquage immunologique. Chez les isolats pathogenes et non pathogenes de V. inaequalis cultives in vitro, la distribution des epitopes glycoproteiques des fimbriae correspond a un profil plus complexe que celui rencontre chez M. violaceum.