ISOLATION AND IDENTIFICATION OF MYCOPLASMA FROM CASES OF PNEUMONIA IN FEEDLOT LAMBS

Mohammad A Hamad ,Zahraa M Al-Jumaa

doi:10.21608/avmj.2014.171027

Abstract

The present study was performed to detect and isolate the Mycoplasma as causative agent of atypical pneumonia in feedlot lambs. Samples (180) were collected from lambs suffering clinically from pneumonia. During the period October 2013 to March 2014. These samples were included nasal swabs (60), tracheal swabs (60) and infected lungs (60). Samples were cultured in the selective media (Mycoplasma Broth Base) and incubated aerobically at 35C° for 4 – 14 days. When turbidity appeared inoculum of each broth was cultured on Mycoplasma Glucose Agar medium and incubated at 35C° for 7 -14 days in candle jar. Primary isolation was demonstrated by color changing of diphasic media, The ability of staining with Dennis stain, reduction of Tetrazolium, red blood cell lysis and fried egg appearance of Mycoplasma colonies was also studied. The results of present study also showed the total rate of Mycoplasma isolation (49.4%) from total samples, and the highest rate of isolation was from Nasal swabs (58%). While, the rate of isolation from Tracheal swabs (55.3%) and from infected lungs (35%).

Highlights

‫تضمنت الدراسة الحالیة عزل وتشخیص المایكوبلازما بوصفھا كأحد مسببات التھاب الرئة اللا نمطي في حملان التسمین ‪
(Koenman et al, 1997‬أما نتائج‬ ‫الاختبارات الكیماحیاتیـة للتأكـد م ن ن وع الجرثوم ة اختب ر اخت زال التترازولی ـم حی ث أن م ستعمرات المایكوبلازم ا ظھ رت بالل ـون الأحم ر وھ ذا‬ ‫مطابـق لما توصل إلیـھ كـل من )النعیمي ؛ ‪ ٢٠٠١‬؛ الاغا ؛ ‪ (٢٠١٢‬ویـعـود السبـب إلـى قدرتـھا على اخـتزال مـركب ‪2-(P-iodophenyle)-‬‬ ‫‪ 3-nitrophenyle-5-phenyle tetrazolium chloride.‬العـدی ـم الل ـون إل ى مرك ب غی ـر ذائ ـب یتـرس ـب داخ ل خلایـاھ ـا لیغی ـر ل ـون‬ ‫المستعمـرة إلـى اللـون الأحمـر وھــو مـركـب الفـورمـازان )‪ .(Formazan‬أمـا اختبــار تخمـر الكربوھیـدرات باستخـدام الوسـط ثنـائي الطــور‬ ‫)‪ (Methylen Blue-Glucose Diphasic medium‬فقد أدى إلى ظھور الطور الصلب باللون الأصفر أما الطور السائل فكان باللون الأخضر‬ ‫وھذا یتفق مع النتائح التي تم التوصل إلیھا من قبل كل من )النعیمي ؛ ‪ ٢٠٠١‬؛ الاغ ا ؛‪ (٢٠١٢‬وذل ك لان المایكوبلازم ا لھ ا الق درة عل ى اس تھلاك‬ ‫الجلوكوز الموجود في الوسط الغذائي وإنتاج الحامض الذي بدوره یقلل الدالة الحامضیة للوسط ویؤدي إلي تحول لون الفینول الأحمر من الأرجواني‬ ‫إلى اللون الأصفر وفي الوقت ذاتھ یختزل المیثیلین الأزرق من قبل المایكوبلازما ویصبح عدیم اللون إذ یلحظ تغیر ل ون الط ور ال سائل م ن الل ون‬ ‫الأرج واني إل ى الل ون الأخ ضر أو الأخ ضر الم صفر فیم ا یتح ول ل ون الط ور ال صلب م ن الارج واني إل ى الل ون الأص فر أو الأص فر البرتق الي‬ ‫)‪ .(Koenman et al, 1997‬ك ذلك درس ت نت ائج الاختب ارات الكیمیاحیاتی ة الأخ رى مث ل اختب ار ان زیم الكت الیز حی ث كون ت م ستعمـرات‬ ‫المایكوبلازما فقـاعات بعـد إضافـة قطرة م ـن بیروك سید الھیـدروجی ـن ‪ (H2O2) 3%‬إل ـى ج زء م ن الم ستعمرة المنقـول ـة عل ى سط ـح شریح ـة‬ ‫زجاجیـة )‪ ; Atlas et al.,1995‬النعیمي ؛‪ ٢٠٠١‬؛ الاغا‪