Abstract
pHT253 and pHT254 belong to the plasmid system carrying Pgrac100, a strong promoter, which were commercialized in the global market in 2012 have pushed forward the use of Bacillus subtilis as host for the production of recombinant proteins. Along with strong promoter Pgrac100, these two plasmids were added His-tag to before and after MCS (Multi Cloning Site) in pHT253 (Pgrac100-8xHis-MCS) and pHT254 (Pgrac100- MCS-8xHis), respectively, to facilitate purification steps. Depending on the farget protein, the user selects appropriate effective strategy of fusing His-tag, i.e. either into the N- or the C-temimal of protein. In this study, the GFP gene was used as an indicator gene to investigate the influence of the His-tag position on the protein expression in B. subtilis. Our results showed that the expression of GFP in B. subtilis significantly was reduced in the fusion form with His-tag at the N-terminal. Thiswouldbe important information for the selection of suitable vectors.
Highlights
The use of Bacillus subtilis as host for the production of recombinant proteins
Các plasmid được sử dụng bao gồm pHT254 chứa promoter Pgrac100 và gen 8xHis nằm sau vùng MCS; plasmid pHT1169 đã được tạo ra trong một đề tài khác bằng cách chèn gen chỉ thị gfp vào vùng MCS của plasmid pHT253
PHT253 and pHT254 belong to the plasmid system carrying Pgrac100, a strong promoter, which were commercialized in the global market in 2012 have pushed forward the use of Bacillus subtilis as host for the production of recombinant proteins
Summary
Hệ thống các plasmid mang promoter mà người sử dụng lựa chọn chiến lược dung mạnh Pgrac100, pHT253 và pHT254 được hợp His-tag vào đầu N hoặc C của protein thương mại hóa trên thị trường thế giới vào sao cho hiệu quả. Năm 2012 đã góp phần thúc đẩy việc sử GFP được chọn như một gen chỉ thị nhằm dụng Bacillus subtilis làm chủng chủ trong khảo sát ảnh hưởng vị trí dung hợp của Hisbiểu hiện protein tái tổ hợp. Kết quả mang một promoter mạnh, hai plasmid này cho thấy sự biểu hiện của GFP trong B. Tùy từng protein mục tiêu Từ khóa: Bacillus subtilis, GFP, His-tag, Pgrac100, pHT253, pHT254
Sign-in/Register to view highlights & summary Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
