Inhibitory effects of virazole and actinomycin D on turnip yellow mosaic virus replication in chinese cabbage protoplasts

Abstract

The effects of virazole (1-β-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide) and actinomycin D on the replication of turnip yellow mosaic virus (TYMV) in Chinese cabbage mesophyll protoplasts were studied. When added to the protoplasts after inoculation of the latter with TYMV, both virazole and actinomycin D inhibited TYMV replication. Inhibition of virion production was nearly 100% with virazole (10 μg/ml) and up to 70% with actinomycin D (10 μg/ml). Virazole prevented polyplast formation, a TYMV-specific cytopathic effect; actinomycin D did not. When added 8 h post-inoculation (p. i.), virazole no longer inhibited polyplast formation but it still inhibited virion production by more than 90%. In contrast, when actinomycin D was added 8 h p. i., it has no effect on virion production nor on viral RNA synthesis, even though cellular rRNA and tRNA synthesis was strongly inhibited. In the presence of virazole, the formation of both viral RNA and proteins was inhibited, but the synthesis of host rRNA, tRNA and proteins seemed to be unaffected by the nucleoside analogue. Inhibition of TYMV replication by virazole was effective when the drug was added either before or during the period of active viral RNA replication. Inhibition by actinomycin D was effective only when the antibiotic was added during the latent phase of infection, i. e. before the period of active viral RNA replication. The involvement of a cellular mRNA in the initiation process of TYMV replication is discussed. Lorsqu'ils sont administrés immédiatement après inoculation des protoplastes avec le virus de la mosaïque jaune du navet (VMJN), le virazole et l'actinomycine D inhibent la multiplication virale. L'inhibition est de 70% en présence d'actinomycine D (10 μg/ml) et voisine de 100% en présence de virazole (10 μg/ml). Le virazole, contrairement à l'actinomycine D, inhibe la formation des polyplastes, effect cytopathogène spécifique du VMJN. Lorsque le virazole est ajouté 8 h après inoculation, il n'inhibe plus la formation des polyplastes mais inhibe encore à plus de 90% la production des virions. Au contraire, l'actinomycine D, lorsqu'elle est ajoutée 8 h après inoculation, n'a plus d'effet sur la multiplication virale. Le virazole inhibe la synthèse des protéines et des RNA viraux, mais il ne semble pas affecter la synthèse des protéines, rRNA ou tRNA cellulaires. La multiplication du VMJN est inhibée par le virazole lorsque celui-ci est présent avant ou pendant la période de replication active du RNA viral. Par contre la multiplication du VMJN n'est inhibée par l'actinomycine D que si l'antibiotique est ajouté immédiatement après inoculation pendant la phase de latence de l'infection. L'implication d'un mRNA cellulaire dans une étape précoce de la replication du VMJN est envisagée.