Inhibitory effect of von Willebrand factor-cleaving protease on angiogenesis

Abstract

目的观察血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS13）对血管内皮细胞生长因子（VEGF）介导的血管新生的抑制作用。方法以不同浓度的ADAMTS13（1、5、25、50、100 nmol/L）处理脐带静脉内皮细胞（HUVEC），采用MTT法检测ADAMTS13对HUVEC增殖的影响，通过管腔形成实验观察ADAMTS13对HUVEC分化的影响，通过刮伤愈合实验观察ADAMTS13对HUVEC迁移的影响，利用鸡胚绒毛尿囊膜实验和基质胶塞实验观察ADAMTS13在体内对血管新生的影响。结果与对照组相比，25、50、100 nmol/L ADAMTS13对HUVEC增殖均有明显的抑制作用（P值均<0.01）。在刮伤愈合实验中，制造损伤8 h后，对照组HUVEC的迁移距离为（79±22）µm, VEGF处理组为（250±8）µm，VEGF+ADAMTS13处理组为（170±23）µm，组间差异均有统计学意义（P值均<0.05）。在管腔形成试验中，VEGF处理组、VEGF+ADAMTS13处理组HUVEC培养16 h后形成的管状结构长度分别是对照组的（450.6±16.6）%、（235.3±19.0）%，VEGF+ADAMTS13处理组管状结构少于VEGF处理组（P< 0.001）。鸡胚绒毛尿囊膜实验中，VEGF（20 ng/ml）、ADAMTS13（100 nmol/L）、ADAMTS13（100 nmol/L）+VEGF(20 ng/ml)处理组的血管形成数量分别为对照组的（228.2±10.8）%、（69.2±21.1）%、（184.6±15.2）%。基质胶塞实验结果显示VEGF+ADAMTS13处理组小鼠体内的血管数量为VEGF组的43.5%。结论体外实验结果表明ADAMTS13对HUVEC增殖、分化、迁移能力均有抑制作用；体内实验结果提示ADAMTS13对血管新生有抑制作用。