Influence of tetrapeptide tuftsin on intracellular pH of mouse peritoneal macrophages

S K Pirutin,A A Kamensky,V B Turovetsky,A B Druzhko,V N Kalihevich,N Y Sarycheva

doi:10.3103/s0096392516010077

Abstract

It has been shown by the method of probe microfluorimetry of single cells that tuftsin at concentrations of 0.1 and 1.0 μg/mL, increasing the phagocytic activity of murine peritoneal macrophages, causes biphasic changes in the intracellular pH (pHi) over time. First there was a decrease in pHi, reaching the limit in 5 min of incubation. Then, the pHi value increased until reaching the maximum 30 min after the interaction between the cells and the agent. Afterwards, the observed parameter (pHi) did not vary up to minute 55. It was shown that there was no increase in intracellular pH on the addition of the Na+/H+-exchange blocker ethylisopropylamiloride to the incubation medium in the presence of tuftsin. This fact suggests that the observed increase in pHi during tuftsin treatment in the second phase of cell response is associated with the Na+/H+ exchange system.

Highlights

В связи с активным применением в медицине биологически активных эндогенных пептидов и их синтетических аналогов в последние годы значительное внимание уделяется исследованиям механизмов их действия [1,2,3]
Ко второй минуте взаимодействия клеток с пептидом происходит восстановление рНi до исходного уровня, а затем наблюдается постепенное возрастание внутриклеточного рН, достигающее к 7 мин инкубации величины 0,12 ед. выше уровня контроля
This finding can be the evidence that the observed increase of pHi during tuftsin treatment through the second phase of cellular response connected with the system of Na+/H+ exchange

Summary

Материалы и методы

Выделение клеток и посадку их на стекла осуществляли, как описано ранее [11]. В работе использовали тетрапептид тафцин в концентрациях 0,1 и 1,0 мкг/мл, в которых, как ранее было показано [9], он вызывает увеличение фагоцитарной активности макрофагов и их внутриклеточного рН. Определение величины внутриклеточного рН осуществляли при помощи микрофлуориметрического метода анализа одиночных клеток с использованием флуоресцентного зонда флуоресцеиндиацетата (5 мкг/мл, “Serva”, Германия) [9, 12]. После определения рНi нативных клеток к ним добавляли тафцин в указанных выше концентрациях. Изменение внутриклеточного рН мышиных перитонеальных макрофагов во времени при действии тафцина. По оси абсцисс: время после введения в среду инкубации тафцина в коцентрации 0,1 мкг/мл (1) и 1,0 мкг/мл (2); По оси ординат: изменение внутриклеточного рН по сравнению с контролем (ΔрНi). Различия между средними арифметическими значениями параметров считали достоверными при р < 0,05

Результаты и обсуждение

Действующий агент

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ