Abstract

Polyunsaturated fatty acids (PUFAs), omega-3 ones in particular, form phospholipid layer of biological membranes, which provides normal functioning of membrane-associated complexes of enzymes and transmembrane transport. Free omega-3 PUFAs regulate the transcription of many genes, and thereby have an effect on the level of metabolic processes, particularly control of lipid and carbohydrate metabolism in the liver. Cytochrome P450 2El (1.14.14.1) causes the transformation of lipophilic exogenous and endogenous substances, as well as involvement in homeostasis, both at the cellular and systemic levels. The aim is to study changes in expression of cytochrome P450 2E1, and to assess the antioxidant system and the level of peroxidation processes in the liver of experimental animals under the chronic action omega-3 PUFAs. During experiment more than two-fold increase in the content of cytochrome P450 2El was observed in the liver of rats which additionally received omega-3 PUFAs for 4 weeks in the standard daily diet. At the same time, such changes in the enzyme expression did not lead to an imbalance of pro- and antioxidant processes in the liver.

Highlights

  • Матеріали і методиВ експерименті було використано 12 щурів-самців лінії Wistar розведення віварію Інституту фізіології ім

  • Відомо, що печінка виконує провідну роль у біотрансформації і детоксикації більшості речовин ендогенного та екзогенного походження

  • Печінка забезпечує швидку адаптацію організму до змін раціону, а саме вмісту в продуктах харчування певних органічних речовин [1]

Read more

Summary

Матеріали і методи

В експерименті було використано 12 щурів-самців лінії Wistar розведення віварію Інституту фізіології ім. Рівень протеїну CYP2E1 у печінці визначали методом Вестерн-блот аналізу, використовуючи специфічні поліклональні антитіла: anti-CYP2E1 (одержані у відділі молекулярної онкогенетики Інституту молекулярної біології і генетики НАН України раніше) та anti-β-actin (Sigma, США). Концентрацію протеїну визначали за методом Лоурі [11]. Перенесення протеїну на нітроцелюлозні мембрани здійснювали за допомогою напівсухого електротрансферу при 200 мА впродовж 40 хв. Вестерн-блот аналіз проводили, обробляючи мембрани 4%-им розчином знежиреного молока (Sigma, США) у PBST-буфері, після чого впродовж 1 год інкубували в розчині поліклональних anti-CYP2E1. Після відмивання PBST-буфером мембрани інкубували із вторинними anti-Rabbit антитілами, кон’югованими з пероксидазою хрону (Sigma, США). Результати Вестерн-блотингу візуалізували та обраховували за допомогою спеціального обладнання ChemiDocTM XRS+ System with Image LabTM Software (Bio-Rad, США). Вестерн-блот аналіз із використанням anti-β-actin проводили згідно з рекомендаціями фірми виробника (Sigma, США).

Результати та обговорення
Групи тварин
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call