Abstract
Aim. In this study we developed and characterized a mouse model of secondary S. aureus and S. pneumoniae pneumonia following influenza virus infection with H1N1 pandemic and laboratory strains and their reassortment. Materials and methods. BALB/с mice were infected intranasally with A/California/04/2009/(H1N1 pndm), A/Puerto Rico/8/34 or their reassortment NIBRG-121xp followed by different strains of S. аureus и S. pneumoniae. The pathogenicity of infection was assessed by mouse survival and weight change, viral titre and bacterial count in the lungs. Results. It was shown that the infection of mice with three strains of the H1N1 influenza virus with a comparable level of pathogenicity leads to a different severity of secondary bacterial infection. The mouse adapted A/California/04/2009 pandemic strain possessed the greatest ability to alter antibacterial immunity. Conclusion. An experimental model of post-influenza bacterial pneumonia utilizing three strains of the H1N1 influenza virus and various strains of S. aureus or S. pneumoniae was established. The ability of viruses to provoke bacterial superinfection of different severity is characterized.
Highlights
INDUCTION OF SECONDARY BACTERIAL PNEUMONIA IN MICE INFECTED WITH PANDEMIC AND LABORATORY STRAINS OF THE H1N1 INFLUENZA VIRUS
In this study we developed and characterized a mouse model of secondary S. aureus and S. pneumoniae pneumonia following influenza virus infection with H1N1 pandemic and laboratory strains and their reassortment
Пандемический вирус гриппа А/Калифорния/04/2009 без предварительной адаптации к мышам не обладал летальной активностью, что коррелировало с его низкой репродукцией в легких, однако проведенная нами адаптация этого вируса путем 5 пассажей через легкие мышей привела к получению патогенного варианта, инфицирование которым вызывало смертность животных, потерю ими веса (23%), а также репродукцию вируса в легких
Summary
В опытах использовали клетки MDCK, полученные из коллекции НИИ вирусологии. Для моделирования гриппозной инфекции были использованы штамм вируса гриппа А/Калифорния/04/2009 (пндм H1N1 2009), полученный из ВОЗ, а также лабораторный штамм вируса гриппа А/Пуэрто Рико /8/34(H1N1) и реассортант NIBRG-121xp (А/Калифорния/04/2009 (пндм H1N1 2009)XА/Пуэрто Рико /8/34(H1N1) (2:6), полученные из музея НИИ гриппа. Затем осуществляли посев на питательный агар Мюллера-Хинтона (HiMedia Laboratories, Индия) для S.aureus и ГРМ-агар с добавлением 5% лошадиной крови (ЗАО «ЭКОлаб») для S.pneumoniae. Чашки инкубировали в течение 18 ч при температуре 37°С (в 5,5% СО2 среде для S.pneumoniae). Далее на 4 день после вирусного заражения мышей инфицировали повторно интраназально различными дозами S.pneumoniae и S.aureus (в объеме 0,05 мл). Описанных в [2], супернатант отбирали для определения бактериальной плотности и определения инфекционного титра вируса в культуре клеток MDCK в 96-луночных планшетах, как описано в [2]. Для определения плотности бактерий из полученных образцов гомогенизированных легких готовили серийные разведения и осуществляли прямой высев на чашки Петри с агаром Мюллера-Хинтона для S.aureus и ГРМ-агар с добавлением 5% лошадиной крови для S.pneumoniae. Учет КОЕ проводили после 18 часов инкубации при температуре 370С (в 5,5% СО2 среде для S.pneumoniae). Количество выросших колоний умножали на степень разведения и коэффициент, обратный количеству посеянного материала
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
More From: Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology
Disclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.