Identification of pathogen Mycoplasma species using multiplex PCR from chickens and turkeys having clinical symptoms

Abstract

Patojen mikoplazmalar, birçok ülkede olduğu gibi Türkiye’de de ciddi ekonomik kayıplara neden olabilen etkenlerdir. İzolasyonun uzun sürmesi, serolojik tanı yöntemlerinin ise çapraz reaksiyonlar sonucu hatalı pozitif sonuçlar vermesi, son yıllarda PCR temelli moleküler yöntemlerin geliştirilmesini ve yaygın olarak kullanımını sağlamıştır. Bu çalışmada amaç, Mycoplasma gallisepticum (MG), Mycoplasma synovia (MS) ve Mycoplasma meleagridis (MM) etkenlerini bir multipleks PCR yöntemiyle tek seferde tanımlamak ve bu yöntemin rutin teşhiste kullanılabilirliğini araştırmaktır. Çalışmada laboratuvara getirilen ve klinik belirtileri mikoplazma infeksiyonları yönünden şüpheli, tavuk ve hindilerden aseptik şartlarda alınan toplam 100 svab örneği kullanıldı. Bu örnekler Frey’s besiyerinde inkübe edildi ve buradan DNA ekstraksiyonu yapıldı. Yapılan multipleks PCR testi sonucunda tavuklarda (n=50) MG ve MS için sırasıyla 9 (%18) ve 5 (%10) pozitiflik saptandı. 2 tavukta (%4), hem MG hem de MS beraber pozitif bulundu. Tavuk numunelerinin hiçbirinde, MM için spesifik bant oluşumu tespit edilmedi. Hindilerde ise (n=50) MG, MS ve MM için pozitif hayvan sayısı sırasıyla 6 (%12), 4 (%8) ve 3 (%6) olarak tespit edildi. MG ve MS bantlarının beraber tespit edildiği hindi sayısı 12 (%24) iken, 1 hindide (%2) MG ve MM, 3 hindide ise (%6) MM ve MS etkenleri beraber izlendi. Numunelerin hiçbirinde üç etkene ait spesifik bant oluşumu gözlenmedi. Sonuç olarak Şanlıurfa bölgesinde kanatlı türlerine ait önemli patojen mikoplazma etkenlerinin bulunduğu, multipleks PCR testi ile kısa sürede ve yüksek duyarlılıkta çok sayıda etkenin aynı anda ve daha hızlı tespitinin sağlandığı ayrıca koruma ve kontrol önlemlerinin alınmasında başarıyla kullanılabileceği sonucuna varıldı.