Abstract
O objetivo deste trabalho foi verificar as ações do fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF; P), da insulina (I), do retinol (R) e de suas associações (PI, PIR, IR e PR) na maturação nuclear (MN) de oócitos bovinos e suas conseqüências no desenvolvimento embrionário (DE). O meio básico para maturação dos oócitos nos diferentes tratamentos foi o TCM-199 modificado acrescido de PVA (controle). No DE, foram utilizados os grupos R, PIR, IR, um controle negativo (PVA) e um controle positivo, contendo soro fetal bovino e gonadotrofinas (SFBHOR). Os fatores P, I, R e suas associações não aceleraram a MN em 7h mas sim após 18h (P<0,001), com exceção dos tratamentos R e PR, nos quais as percentagens de metáfase II foram, respectivamente, de 4,7% e 8,3%, similares à obtida no grupo-controle (0,0%). Considerando um nível de significância de P<0,0001 em comparação ao grupo-controle, os maiores índices de metáfase II foram obtidos na presença das associações IR (19,0%) e PIR (21,3%). No DE, R (18,3%), PIR (13,9%) e IR (10,6%) incrementaram os índices de clivagem, comparados ao PVA (0,0%; P<0,001), porém não atingiram os índices do grupo SFBHOR (53,8%; P<0,001). Conclui-se que insulina e PDGF aceleram a MN e suas ações são potencializadas pelo retinol. Os índices de clivagem de oócitos maturados na presença de R, IR e PIR são superiores aos do PVA, mas significativamente inferiores aos maturados em SFBHOR.
Highlights
O processo de maturação nuclear de oócito compreende o término da primeira redução meiótica, incluindo as fases desde a progressão do estádio de diplóteno da primeira prófase meiótica até metáfase II (MII)
No início do desenvolvimento embrionário, a clivagem em meio quimicamente definido é afetada positivamente pelo retinol, insulina-retinol e platelet-derived growth factor (PDGF)-insulina-retinol, mas não atinge índices similares aos de oócitos maturados na presença de soro fetal bovino e hormônios gonadotróficos
YANG, B.K., YANG, X., FOOTE, R.H. Effect of growth factors on morula and blastocyst development of in vitro matured and in vitro fertilized bovine embryos
Summary
Utilizaram-se 1.260 ovários de fêmeas bovinas, obtidos em matadouro e transportados em solução de cloreto de sódio a 0,9% acrescido de penicilina (100 UI/ml) e estreptomicina (50μg/ml) à temperatura de 30oC. Após cada período de incubação, os oócitos foram retirados de seus grupos com micropipeta de vidro e depositados em tubo de ensaio contendo 2ml de TCM-199 modificado. Para a realização do segundo experimento, foram utilizados um total de 505 CCOs com pelo menos três camadas de células do cumulus oophorus, ooplasma de coloração marrom e homogênea. A inseminação (dia 0) dos oócitos maturados foi realizada pela adição de 50μl de espermatozóides às gotas de 200μl de meio Fert-TALP contendo 10μg de heparina/ml (Parrish et al, 1986; Schweitzer, 1996). As células do cumulus foram retiradas com uma micropipeta de vidro e os oócitos lavados três vezes e transferidos para as gotas de 200μl de TCM-Light (Romero et al, 1991) para o desenvolvimento embrionário.
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