Abstract
健康成年雄性SD大鼠180只,随机数字表法分为对照组(20只,常规清洁饲养)、布加综合征(BCS)模型组(80只,部分结扎大鼠肝后段下腔静脉)和假手术组(80只,不结扎下腔静脉,其他处理同模型组)。模型组及假手术组又各随机分4个亚组(实验1、3、6、12周组),每亚组20只大鼠。实验开始后1、3、6、12周末行DSA证实造模成功后每组随机抽取12只大鼠处死,留取肝脏组织,行免疫组化、HE及Masson染色,以实时聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测TGF-β1、PDGF-A及PDGF-B的mRNA及蛋白相对表达量。通过Levene法检验数据符合方差齐性后,以方差分析比较组内、组间的总体差异,采用LSD法行组内、组间两两比较,采用Pearson法分析各因子间相关性,以Spearman法分析各因子与肝纤维化间相关性。 结果 显示,转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-A(PDGF-A)及PDGF-B的mRNA表达在对照组与假手术组间差异无统计学意义(TGF-β1:F=0.805,PDGF-A:F=0.620,PDGF-B:F=0.553,P值均>0.698)。模型组分别与对照组及假手术组比较差异均具有统计学意义(TGF-β1:F值分别为644.812,294.224,P值均<0.001;PDGF-A:F值分别为180.578,256.130,P值均<0.001;PDGF-B:F值分别为210.056,568.468,P值均<0.001);且模型组各亚组表达均高于同一时间的假手术亚组及对照组(P值均<0.05)。模型组术后各时间点的TGF-β1、PDGF-A及PDGF-B的mRNA表达总体差异均有统计学意义(F值分别为565.205,120.014,154.406,P值均<0.001),且同一因子模型组各亚组间两两比较差异亦均有统计学意义(P值均<0.05)。TGF-β1、PDGF-A及PDGF-B在各组间及组内的蛋白表达变化规律与mRNA表达一致。模型组3个因子的mRNA水平与相应蛋白表达均呈正相关(r=0.841,0.941,0.931;P均<0.001)。3个因子与肝纤维化均无明显相关性。表明BCS病理损伤与组织修复是一个多因子、多进程、相互交织的复杂过程,每个因子在不同的病程阶段产生的作用不同。
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