Abstract
The use of lyophilization as a means of preserving commercial properties of the dried live plague vaccine is closely linked to a number ofresistant microbial cells surviving in the preparation after microbial population exposure to such stress action. Lyophilized live vaccine efficiency, even without violation of storage rules at low temperatures (4 ± 2 – 6 ± 2 оС), decreases gradually due to death of live cells of microorganisms forming the base of a vaccine. Aim: The aim of this study was to enhance resistance of the reference vaccine strain Yersinia pestis EV of NIIEG lineage to freeze-drying in vacuum (lyophilization) by different techniques: the use of lyophilization process per se as a selection factor, resistant clone selection from populations of strains which underwent single, double and triple lyophiliation, strain culturing at low temperatures (4 ± 2 – 6 ± 2 °С). Summary and conclusion: It was demonstrated that after double and triple lyophilization the Y. pestis EV strain resistance to the process increased by 3–3.5 times. Clonal selection of twice and three times lyophilized variant facilitated detection of resistant clones and stabilization of this property.The clones selected were characterized by increased immunogenicity, high heat stability, as well as by increased duration of vaccine efficiency (by 2.3 times). A psychrophilic variant of Y. pestis EV strain was obtained in vitro acquiring higher resistance to lyophilization (in 2 times or more) in comparison with the reference strain. The number of psychrophilic variant cells surviving post-liophilization was higher in comparison with the commercial strain. Thus the methods used in this study for selection of strains and clones with the highest resistance to lyophilization from Y. pestis EV reference strain population showed a significant potential for quality improvement of dried live plague vaccine. So, the possibility of receiving of a vaccine of more high quality by means of the ways of selection explained in our work is experimentally confirmed. Effectiveness of these ways creates prerequisites for their use in production of a live plague vaccine.
Highlights
Введение Микробные популяции в силу своей естественной изменчивости генетически и фенотипически неоднородны [1, 2]
Популяционный анализ однократно, дву- и трехкратно лиофилизированных культур Y. pestis EV с последующим отбором устойчивых к лиофилизации клонов показал, что по этому признаку популяции чрезвычайно неоднородны
Количество микробных клеток в экспериментальном препарате, приготовленном на основе одно, дву- и трехкратно лиофилизированных культур Y. pestis EV The number of microbial cells in the experimental preparation prepared on the basis of one, two- and threefold lyophilized cultures of Y. pestis EV
Summary
Экспериментальная адаптация вакцинного штамма чумного микроба к процессу лиофилизации. Y. pestis EV линии НИИЭГ к лиофилизации с помощью разных методических подходов: использование самого процесса лиофилизации в качестве селекционирующего фактора; селекция устойчивых клонов из популяций одно-, дву- и трехкратно лиофилизированных культур; культивирование штамма при низких температурах (4 ± 2 – 6 ± 2 °С). На основе дву- и трехкратно лиофилизированных культур, и селекционированных из их популяций клонов с повышенной устойчивостью к лиофилизации, готовили экспериментальные серии вакцинных препаратов, которые исследовали на жизнеспособность, иммуногенность и термостабильность. Популяционный анализ однократно, дву- и трехкратно лиофилизированных культур Y. pestis EV с последующим отбором устойчивых к лиофилизации клонов показал, что по этому признаку популяции чрезвычайно неоднородны. Число устойчивых к лиофилизации клонов в одно -, дву- и трехкратно лиофилизированных популяциях штамма Y. pestis EV было различным: в однократно лиофилизированных культурах процент устойчивых вариантов составлял – 7,5, двукратно – 17,5, трехкратно – 12,5. Количество микробных клеток в экспериментальном препарате, приготовленном на основе одно-, дву- и трехкратно лиофилизированных культур Y. pestis EV The number of microbial cells in the experimental preparation prepared on the basis of one-, two- and threefold lyophilized cultures of Y. pestis EV
Sign-in/Register to view highlights & summary Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
