Exogenous all-trans retinoic acid affects the expression and distribution of cone opsin in the postnatal guinea pig

Abstract

目的 观察一定浓度的外源性全反视黄酸(alltrans retinoic acid,ATRA)对豚鼠锥细胞视蛋白表达和方向性的影响.方法 出生1周豚鼠28只,随机分为ATRA组(n=14)和正常对照组(n=14).ATRA组随机选取一眼于暗红光下球周注射0.4 mg/ml浓度ATRA 0.05 ml,对照组随机选择一眼球周注射稀释ATRA用的相应浓度二甲基亚砜(0.001ml/L)和注射用水共0.05 ml.4周后取眼球,行免疫组织化学方法和RT-PCR技术观察M-视蛋白和S-视蛋白的分布和表达密度,并检测两种视蛋白的mRNA表达,方向性以Leica光学显微镜进行观察.结果 ATRA处理眼S-视蛋白的表达密度:下方为(499.4±147.6)mm-2,上方为(87.8±44.9)mm-2,中央为(968.4±210.2)mm-2;正常组S-视蛋白的表达密度:下方为(805.0±203.3)mm-2,上方为(100.0±57.7)mm-2;中央为(1637.2±314.1)mm-2.ATRA处理眼M-视蛋白的表达密度:上方为(1326.1±267.0)mm-2,中央为(2984.0±613.4)mm-2,下方为(232.9±173.6)mm-2;正常组M-视蛋白的表达密度:上方为(946.2±388.5)mm-2,中央为(1666.7±137.8)mm-2,下方为(175.0±100.9)mm-2.0.4 mg/ml浓度的ATRA 0.05 ml局部球周注射后使豚鼠视网膜的M-视蛋白的表达密度较正常对照组增加,S-视蛋白的表达密度减少.RT-PCR检测示M-视蛋白的相对光密度值分别为1.25±0.11(ATRA处理眼)和0.51±0.10(对照眼),S-视蛋白的相对光密度值分别为0.61±0.09(ATRA处理眼)和1.25±0.06(对照眼).ATRA处理眼与对照眼相比,M-视蛋白的mRNA表达增加,S-视蛋白的mRNA表达下降,两因素方差分析示两组差异均有统计学意义(P＜0.05).铺片的免疫组化结果经光学显微镜观察提示,正常豚鼠视网膜M-视蛋白有-较小的偏斜角,朝向较垂直.ATRA作用后可见M-视蛋白偏斜角明显,朝向水平位,而且排列极有规律.对S-视蛋白的方向性没有影响.结论 豚鼠锥细胞视蛋白的表达和方向性在出生后仍具有可塑性.0.4 mg/ml的ATRA球周局部作用后增加M-视蛋白的mRNA表达,减少S-视蛋白的mRNA表达;使豚鼠视网膜的M-视蛋白的表达密度增加,S-视蛋白的表达密度减少;中波敏感性锥细胞不仅内节具有方向性,其外节视蛋白也具有方向性.ATRA可使M-视蛋白的方向性更为有规律,但对S-视蛋白的方向性没有影响作用。