Abstract
Bacillus subtilis has been developed as an attractive expression host because of many advantages. For examples, it is nonpathogenic and allows secretion of functional extracellular proteins directly into the culture medium; about 60 % of industrial enzymes available produced by Bacillus species. To use B. subtilis strain for research and as host strain for expression of recombinant protein, bacterial genetic methods should be developed. Electroporation to transfer directly DNA into B. subtilis is one of the methods that draw a lot of attention of scientists. A problem encountered in the methods that draw a lot of attention of scientists. A problem encountered in the electroporation of DNA into B. subtilis is that an established protocol for one strain can hardly be used for another strain. B. subtilis 1012 and WB800N have recently been used as expression hosts for expression of recombinant proteins, but electroporation method has not been established. In this study, we use a pHT plasmid to establish an electroporation protocol for B. subtilis 1012 and WB800N. The influence of sampling time, concentration and time for incubating with lysozyme, voltage on the transformation was investigated to establish the protocol.
Highlights
Bacillus subtilis has been developed as an attractive expression host because of many advantages
To use B. subtilis strain for research and as host strain for expression of recombinant protein, bacterial genetic methods should be developed
Electroporation to transfer directly DNA into B. subtilis is one of the methods that draw a lot of attention of scientists
Summary
Bacillus subtilis là chủng chủ biểu hiện 1012 và WB800N được sử dụng phổ biến mang nhiều ưu điểm nổi bật như không sinh trong nghiên cứu cơ bản và làm chủng chủ độc tố, tiết được protein mục tiêu ra môi biểu hiện protein tái tổ hợp trong thời gian gần trường nuôi cấy, khoảng 60 % protein công đây, nhưng phương pháp điện biến nạp cho nghiệp được sản xuất từ các chủng Bacillus. hai chủng này vẫn chưa được thiết lập. Lysozyme, hiệu điện thế và lượng DNA sử Tuy nhiên một vấn đề gặp phải là hiệu suất dụng lên tần suất biến nạp đã được khảo sát biến nạp DNA vào B. subtilis còn thấp và trong nghiên cứu này để hình thành qui trình không ổn định giữa các chủng khác nhau gây điện biến nạp. Quy trình được xây dựng dựa vào phương pháp điện biến nạp cho các chủng B. subtilis của một số bài báo đã được công bố kết hợp với các khảo sát về ảnh hưởng của thời điểm thu mẫu, nồng độ và thời gian ủ lysozyme, hiệu điện thế biến nạp, và lượng DNA. Chúng tôi sử dụng plasmid là pHT10-gfp+ có mang gen kháng kháng sinh Cm (chloramphenicol) và gen chỉ thị gfp để xác định tần suất biến nạp
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a callDisclaimer: All third-party content on this website/platform is and will remain the property of their respective owners and is provided on "as is" basis without any warranties, express or implied. Use of third-party content does not indicate any affiliation, sponsorship with or endorsement by them. Any references to third-party content is to identify the corresponding services and shall be considered fair use under The CopyrightLaw.
