Establishment of cloned homogeneous immunoassay for detection of P53 protein in serum and stool samples from patients with gastric carcinoma

Abstract

目的 评价检测P53蛋白的克隆酶均相免疫分析方法的可行性.方法通过基因重组技术构建β-半乳糖苷酶亚单位EA、ED及ED-P53融合蛋白的原核表达质粒,建立克隆酶均相免疫技术,测定胃癌、非胃癌和正常对照组血清、粪便P53蛋白含量, 并与酶联免疫吸附试验(ELISA)比较.结果 31例胃癌患者的血清、粪便P53蛋白阳性率高于39例非胃癌患者和17名健康献血员(均P<0.01).11例胃癌患者血清P53和免疫组化均阳性,且免疫复合物均以P53-IgG形式存在,对5例胃癌血清动态观察表明,术后1周P53蛋白仍阳性,术后1个月显著下降,并在术后3个月消失.检测10份不同浓度的样本, 表明克隆酶均相免疫法与ELISA具有较好的相关性.结论建立的克隆酶均相免疫技术可用于P53蛋白的测定,P53蛋白可作为判断胃癌预后的一项辅助诊断指标。