Abstract
Este trabalho objetivou a purificação parcial, por precipitação com sulfato de amônio (SA) e cromatografia de filtração em gel (CFG), de compostos presentes no decocto de Adiantum capillus-veneris (avenca) eficientes na indução de fitoalexinas em mesocótilos de Sorghum bicolor sorgo. Decocto de A. capillus-veneris a 1% (peso seco/volume) foi precipitado com concentrações de SA variando de 0 a 100% (em intervalos de 20%), e essas frações foram submetidas à CFG. Para o decocto não precipitado foram obtidos nove picos proteicos e um pico glicídico com massas moleculares variando de 0,61 à 0,01 KDa. Para a precipitação fracionada obteve-se: na fração 0-20% dois picos proteicos (menores que 0,01 KDa) e dois glicídicos com concentração de açúcares variando de 4,1 a 17,5 µg mL-1; na fração 20-40% três picos proteicos (111,5 à 0,98 KDa) e cinco glicídicos (11,3 a 73,7 µg de açúcares mL-1); na fração 40-60% dois picos proteicos (111,5 à 0,09 KDa) e dois glicídicos (5,6 a 7, 5 µg de açúcares mL-1); na fração 60-80% seis picos proteicos (menores que 0,02 KDa) e dois glicídicos (16,5 a 51,3 µg de açúcares mL-1); e na fração 80-100% três picos proteicos (menores que 0,09 KDa). Mesocótilos de sorgo foram tratados com as frações provenientes da CFG, além do decocto a 1%, acibenzolar-S-metil (ASM) (125 mg L-1 do i.a. como eliciador de referência) e tampão fosfato de sódio 10 mM pH 6,0. O pico proteico II (0,09 KDa) do decocto não precipitado induziu fitoalexinas, 6,68% superior a ASM. Entre os precipitados, a fração 60-80% de SA induziu 76% mais que ASM. Dessa forma, pôde-se obter frações proteicas e/ou glicídicas indutoras de fitoalexinas em sorgo de maneira superior ao extrato (decocto) do qual é originária, indicando o potencial dessas moléculas para trabalhos futuros sobre indução de resistência.
Highlights
The one with 60-80% of ammonium sulphate (AS) increased in 76% the induction of phytoalexin compared to ASM
INTRODUÇÃO A indução de resistência consiste na ativação de mecanismos de defesa latentes na própria planta sem qualquer alteração em seu genoma (Romeiro, 2008), esse mecanismo tem sido encarado como forma de controle alternativo de doenças através de plantas em substituição ao uso de pesticidas (Stangarlin et al, 2010)
Para o precipitado com saturação de 4060% de sulfato de amônio (Figura 1 D) obteve-se dois picos proteicos com massas moleculares de 111,5 a 0,09 KDa, e dois picos glicídicos com concentração de açúcares redutores de 5,6 e 7,5 μg mL-1 (Tabela 1)
Summary
Obtenção do extrato de A. capillus-veneris As folhas de avenca, provenientes do município de Marechal Cândido Rondon/PR, foram coletadas em dezembro de 2009, ao meio dia, devido a maior produção de metabólitos secundários neste horário. As folhas foram secas por 10 dias à temperatura de 25oC, trituradas em moinho de faca para obtenção de 60 g do material vegetal, sendo conservadas em local fresco, ao abrigo da luz, conforme metodologia proposta por Teske e Trentini (1997). O extrato aquoso foi obtido por decocção devido a melhor atividade eliciadora de fitoalexinas (Meinerz et al, 2008). Na decocção utilizou-se 1 g do material vegetal em 100 mL de água destilada fria à temperatura de 18oC, aquecendo até a ebulição e. Deixando sob aquecimento por 1 min e, em seguida, reservou-se em recipiente fechado por 10 min
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