Effects of SDF-1/CXCR4 signal pathway blockade by AMD3100 on the adhesion of leukemia cells to osteoblast niche and the drug resistance of leukemia cells

Abstract

目的探讨CXCR4阻断剂AMD3100对白血病细胞与成骨龛黏附的影响及逆转白血病细胞耐药的作用。方法在生物衍生骨上接种白血病患者骨髓来源的间充质细胞，并诱导其分化为成骨细胞，构建一种仿生性的成骨龛，并用ELISA法检测培养上清中SDF-1的表达水平；然后在成骨龛中接种FLT3-ITD突变阳性的白血病细胞株MV4-11细胞，构建三维共培养体系，流式细胞术检测CXCR4的表达水平；在此共培养体系中加入AMD3100后，应用BCECF荧光标记测定白血病细胞的黏附率，流式细胞术分析阿糖胞苷（Ara-C）作用前后白血病细胞凋亡的变化。结果①白血病骨髓成骨细胞培养7、14、21 d上清中SDF-1含量分别为（304±18）、（410±28）和（396±16）pg/ml，第14天达高峰；MV4-11细胞CXCR4表达水平为（72±16）%。②AMD3100作用24 h，成骨龛对MV4-11细胞黏附率为（40.1± 8.1）%，而不加药物的对照组为（65.6±12.1）%，差异有统计学意义（P<0.05）。③加入Ara-C前，AMD3100作用组细胞的凋亡率为（5.6±0.8）%，对照组为（2.5±0.5）%。加入0.02、0.20、2.00 µg/ml Ara-C后，AMD3100作用组细胞凋亡率增加为（10.0±2.4）%、（17.8±2.3）％和（25.1±2.4）%，明显高于对照组[分别为（6.7±1.0）%、（10.3±1.5）%、（16.2±3.1）%]（P值均<0.05）。结论AMD3100能够阻断骨髓成骨细胞龛和白血病细胞的相互作用，在逆转白血病细胞耐药中起重要作用。