Effects of NPM1 gene expression on acute myeloid leukemia cell lines and its mechanism

Abstract

目的探讨NPM1基因表达对急性髓系白血病（AML）细胞系的影响及其机制。方法选取AML细胞系U937和HL-60细胞，转染NPM1质粒至细胞系构建稳定克隆，采用Western blot法鉴定高表达NPM1蛋白的单克隆细胞。MTT法检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率，显微镜下计数检测集落形成能力，Western blot法检测细胞周期相关信号通路蛋白表达，实时荧光定量PCR（RQ-PCR）法检测初诊AML患者骨髓单个核细胞NPM1基因表达水平。结果①U937和HL-60细胞中NPM1高表达组相对细胞增殖率与对照组相比，差异无统计学意义（4.68±1.28对3.89±0.81，3.34±0.37对2.68±0.29，P值均>0.05）。②U937和HL-60细胞中NPM1高表达组S期细胞比例均明显高于对照组[（50.22±3.42）%对（39.78±3.80）%，（59.01±3.27）%对（43.94±2.08）%，P值均<0.05]。③U937细胞NPM1高表达组和对照组相比具有更强的抗凋亡能力[（48.67±3.22）%和（68.77±10.21）%，P<0.05]和集落形成能力（772.7±24.0和652.3±16.5，P<0.05），而HL-60细胞相应的两组细胞上述能力均相似。④NPM1高表达组细胞中CDK4、Cyclin D1、Cyclin D2及Cyclin E表达明显高于对照组，而Cyclin D3表达明显低于对照组。⑤细胞遗传学预后良好组AML患者NPM1定量水平低于预后中等组。结论NPM1蛋白能够促进更多的细胞进入S期，增强抗凋亡和细胞集落形成能力。NPM1定量水平可能预示细胞遗传学的危险度。