Effects of DNA methylation on ABO gene expression in leukemia

Abstract

目的探讨白血病ABO基因启动子区CpG岛甲基化对ABO基因表达的影响。方法以25例白血病患者及20名健康对照者为研究对象，同时以不同浓度去甲基化药物地西他滨处理白血病细胞株K562、HL-60和Jurkat细胞，采用序列特异性引物PCR (PCR-SSP）法检测ABO基因分型，采用实时荧光定量PCR法检测ABO mRNA表达，采用亚硫酸氢盐测序法检测ABO基因启动子区CpG岛甲基化情况。结果①急性淋巴细胞白血病组（10例）和急性髓系白血病组（10例）ABO基因启动子平均甲基化率分别为53.85％和18.22%，明显高于健康对照组（20名，2.33%）和慢性髓性白血病组（5例，2.12%）。②K562细胞的ABO基因型为O1O1，药物作用前后ABO基因型变化不大；HL-60和Jurkat细胞药物作用前基因型无法辨认，药物作用后ABO基因型为O1A1和A1O2。③K562细胞ABO mRNA相对表达水平为1 275.67±35.86，明显高于HL-60和Jurkat细胞（0.54±0.07和0.82±0.16）（P值均<0.05）。④K562、HL-60、Jurkat细胞ABO基因启动子区甲基化率分别为0、58.14％和96.74%；与药物作用前比较，随地西他滨浓度增高，HL-60和Jurkat细胞的甲基化水平下降、ABO mRNA表达水平增高，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。结论ABO基因启动子区甲基化水平与急性白血病ABO基因表达呈负相关，DNA甲基化导致ABO基因沉默是急性白血病ABO抗原表达减弱的重要机制之一。