Effects of berberine hydrochloride on proliferation and collagen secretion of hepatic stellate cells

Abstract

为探讨盐酸小檗碱对LX2人肝星状细胞（HSC-LX2）增殖与胶原分泌的影响，取对数生长期的HSC-LX2细胞，分为空白对照组和盐酸小檗碱低、中、高浓度组（5、10、20 μg/ml），盐酸小檗碱作用12 h。细胞增殖行MTT分析，流式细胞术检测细胞周期情况。通过放射免疫方法检测细胞培养液I型胶原、Ⅲ型胶原含量。通过实时荧光定量PCR检测局部黏着斑激酶(FAK)、I型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶13（MMP-13）、金属蛋白酶组织抑制物l（TIMP-1）mRNA的表达，通过蛋白质印迹法分析FAK、磷酸化FAK、I型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-13、TIMP-1蛋白的表达。与空白对照组比较，盐酸小檗碱干预组细胞的积分吸光度值降低、G(2)/M期细胞比例下降同时G(0)/G(1)期细胞比例增加（P < 0.05），分泌I型胶原、Ⅲ型胶原水平均有下降（P < 0.05），FAK、I型胶原与Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达水平下降（P < 0.05），磷酸化FAK蛋白的表达水平下降（P < 0.05），MMP-13、TIMP-1、MMP-13/TIMP-1 mRNA及蛋白的表达增加（P < 0.05）。提示盐酸小檗碱抑制肝星状细胞增殖与胶原分泌，其机制为通过抑制FAK的磷酸化促进MMP-1和TIMP-1的表达。.