Effect of oleic-linoleic acid and ?-sitosterol to freezing extender of bulls and stallions semen

Abstract

A adição de ácidos graxos poli-insaturados e/ou colesterol ao diluidor pode modificar a composição da membrana plasmática do espermatozoide, influenciando seu comportamento frente à criopreservação e favorecendo, assim, a crioresistência seminal. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição do ácido oleico-linoleico (AOL), ?-sitosterol (?-sit), um análogo vegetal do colesterol, e da associação AOL + ?-sit, ao diluente de congelação de sêmen bovino e equino. As variáveis analisadas foram motilidade/ vigor, integridade das membranas plasmática e acrossomais (Trypan Blue/Giemsa), atividade mitocondrial (DAB) e nível de peroxidação lipídica (TBARS). Os lipídios foram adicionados de acordo com os tratamentos experimentais: C – grupo controle; A1 e A2 – AOL nas concentrações de 37 ?M e 74 ?M; B1 e B2 – ?-sit nas concentrações de 1 ?g ml-1 e 2 ?g ml-1; AB1 e AB2 – AOL 37 ?M + ?-sit 1 ?g ml-1 e AOL 74 ?M + ?-sit 2 ?g ml-1, respectivamente. O trabalho consistiu de três experimentos, sendo que o Experimento 1 testou as concentrações dos grupos A1, B1 e AB1, e o Experimento 2 as concentrações dos grupos A2, B2 e AB2, ambos utilizando sêmen de touro. Para o Experimento 3 utilizou-se sêmen equino, sendo a adição dos lipídios feita em todas a concentrações descritas. Os dados foram submetidos à análise de variância, através do procedimento GLM do SAS, sendo as médias dos tratamentos comparadas pelo teste de Duncan em nível de 5% de significância. Os valores das variáveis avaliadas pós-descongelação diferiram significativamente daqueles obtidos pós-colheita, porém não foi observada diferença significativa entre os tratamentos quando as variáveis foram comparadas dentro do mesmo momento, exceto no Experimento 2, em que os valores de motilidade / vigor pós-descongelação nos grupos acrescidos do ?-sit foram menores que os do controle (C – 51,0 ± 13,7% / 2,9 ± 0,4; B2 – 35,8 ± 15,8% / 2,3 ± 0,6; AB2 – 38,5 ± 16,6% / 2,5 ± 0,5, respectivamente; p < 0,05). Conclui-se que nas concentrações testadas, os lipídios não conferiram maior crioresistência ao espermatozoide, portanto não foram efetivos em preservar a integridade estrutural das membranas plasmática e acrossomais pós-descongelação. Da mesma forma, não houve alteração da atividade mitocondrial nem da peroxidação lipídica frente à adição dos lipídios.