Effect of Circular RNA UBAP2 Silencing on Proliferation and Invasion of Human Lung Cancer A549 Cells and Its Mechanism

Abstract

背景与目的已有的研究证明环状RNA（circular RNAs, circRNAs）在多种肿瘤发生发展中起重要作用，circUBAP2是一种促癌的circRNA，但是其在肺癌中的作用和机制尚不明确。本研究旨在探讨circular RNA UBAP2（circUBAP2）对人肺癌A549细胞体外增殖和侵袭能力的影响并初步探讨其机制。方法应用CCK-8法检测circUBAP2表达沉默对A549细胞生长的抑制作用，采用流式细胞仪技术检测circUBAP2表达沉默对A549细胞周期和细胞失巢凋亡的影响，Transwell实验检测circUBAP2表达沉默对A549细胞侵袭能力的影响，Western blot和Real-time PCR检测CDK6、cyclin D1、p27、c-IAP1、Bcl-2、Survivin、Bax、FAK、Rac1、MMP2的表达变化以及JNK和ERK1/2的活性，荧光素酶报告技术检测circUBAP2直接靶基因。结果CCK-8实验结果显示circUBAP2表达沉默后，A549细胞株增殖能力受抑制；流式细胞结果显示，circUBAP2表达沉默后，细胞周期停滞在G0期/G1期，且细胞凋亡率显著增加；Transwell实验结果显示，细胞体外侵袭能力明显受到抑制。Western blot和Real-time PCR结果显示，circUBAP2表达沉默后，CDK6、cyclin D1、c-IAP1、Bcl-2、Survivin、FAK、Rac1、MMP2等基因的表达水平显著下降，而p27和Bax的表达显著上升，而且JNK、ERK1/2的活性也受到明显的抑制，circUBAP2直接靶基因为miR-339-5p、miR-96-3p和miR-135b-3p。结论circUBAP2在肺癌的体外增殖和侵袭中发挥重要的作用，抑制其表达，有望成为肺癌分子靶向治疗的新靶点。