Effect of Bufalin on proliferation and apoptosis of human non-small cell lung cancer A549 cell

Abstract

背景与目的蟾蜍灵是从中药蟾酥中提取出来的有效成分，其抗肿瘤作用已经在许多体外肿瘤细胞中得到证实，本研究旨在探讨蟾蜍灵对人非小细胞肺癌细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用及其机制。方法采用MTT法测定细胞活力，绘制细胞增殖抑制曲线；瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态学的变化；流式细胞仪通过PI染色进行细胞周期分析及凋亡判定；Western blot法检测Livin及Caspase-3蛋白的表达。结果蟾蜍灵以时间、剂量依赖方式抑制A549细胞增殖，48 h、72 h及96 h抑制细胞增殖50%的药物浓度（half maximal inhibitory concentration, IC50）分别为（56.14±6.72）nmol/L、（15.57±4.28）nmol/L及（7.39±4.16）nmol/L；蟾蜍灵能诱导肺癌细胞凋亡，形态学表现为出现凋亡小体及流式细胞仪检测到的亚二倍体凋亡峰，凋亡率与对照组比较差异有统计学意义（均P < 0.01）；蟾蜍灵诱导细胞凋亡过程中，下调Livin蛋白表达（P < 0.01），同时活化Caspase-3蛋白。结论蟾蜍灵能够抑制肺癌细胞A549的增殖，并诱导其凋亡；抑制凋亡抑制蛋白Livin的活性及活化Caspase-3可能在其抑癌机制中发挥重要作用。