Abstract
Avaliaram-se o desenvolvimento e a qualidade de embriões bovinos, cocultivados com células epiteliais do oviduto bovino (CEOBs) expostas ou não ao estradiol e à progesterona. Os ovócitos foram maturados in vitro por 24h e, então, fertilizados utilizando-se sêmen congelado, em estufa de CO2 a 5% e 38,5ºC. As CEOBs foram cultivadas em TCM-199 com ou sem estradiol (E2) (24 horas), nas mesmas condições da maturação e fertilização in vitro (MIV e FIV), e, em seguida, adicionadas aos diferentes grupos em CR2 com ou sem progesterona (P4) (G1=P4+E2); (G2=E2); (G3=P4) e (G4=controle). Após 18h da FIV, as células foram cultivadas nos diferentes sistemas. Nenhuma diferença (P>0,05) foi observada nas taxas de clivagem entre G1, G2 e G4 (53,5%; 56,3%; 51,7%) e nos padrões de blastocistos (BLs) (29,3%; 31,2%, 28,7%). Índices menores (P<0,05) foram obtidos no G3 para ambas as variáveis (34,5%; 16,4%). G1 e G2 apresentaram taxas de eclosão maiores (P<0,05) que os outros grupos (23,3%; 23,2%), sendo G4 (19,3%) diferente de G3 (16,1%). Em G1, G2 e G3, o número de células nos BLs aumentou 125,9; 128,4 e 123,6, respectivamente (P<0,05), em relação ao G4 (112,5). Conclui-se que o tratamento das CEOBs com o E2, nas primeiras 24 horas de cultivo, pode ser usado isoladamente ou em combinação com a progesterona, a fim de melhorar a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro
Highlights
Inúmeras biotecnologias têm sido desenvolvidas para o melhoramento animal e para a conservação de material genético de alta qualidade em bovinos, como a inseminação artificial (IA), a transferência de embriões (TE) e a produção in vitro de embriões (PIVE), dentre outras biotécnicas mais complexas, que, além do significado científico, têm grande importância econômica e zootécnica
In the groups G1, G2, and G3, the total cell number of the BL increased (125.9, 128.4, and 123.6) (P
XIA, P.; RUTLEDGE, J.; WATSON, A.J. et al Effect of estrogen-treated porcine ampulla oviductal epithelial cells on early embryonic development in vitro and characterization of their protein synthetic activity
Summary
O material coletado foi obtido de fêmeas bovinas de abatedouro, e o processamento do material foi realizado em Laboratório de Fertilização in vitro, da Central de Biotecnologia de Reprodução Animal, localizada no município de Castanhal, PA. Os ovócitos foram distribuídos em gotas de meio de maturação (MIV) (TCM-199 bicarbonato, soro fetal bovino, FSH, LH e estradiol) e levados à estufa de CO2 a 5%, com 38,5oC e alta umidade, onde os ovócitos permaneceram por 24 horas, para posterior fertilização in vitro (FIV). As CEOBs foram lavadas em meio TCM-199-hepes e soro fetal bovino (SFB) por meio de centrifugações sucessivas (10 segundos a 200G), sendo, então, retirada uma alíquota de células para ser distribuída em duas garrafas de cultura contendo o meio TCM-bicarbonato e SFB associado ou não ao E2 (1μg/mL). Após 24 horas de MIV, os ovócitos que mostraram boa expansão das células do cumulus oophorus foram colocados nas gotas de fertilização já contendo os espermatozoides capacitados. Após 18 horas da fertilização, os ovócitos foram desnudos por meio de pipetagens sucessivas em TCM-199-hepes, até a retirada total das células que envolviam os supostos embriões. O programa utilizado para todas as análises foi o BIOESTAT 2.0 (Ayres et al, 2000)
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