Abstract
Objetivou-se avaliar as características morfológica e funcional do sêmen bovino congelado comparando-se a eficácia de dois diferentes diluidores. O ejaculado de quatro touros foi dividido em duas partes iguais, uma submetida ao diluidor Tris e gema de ovo (A) e outra ao diluidor à base de lecitina de soja (Andromed®) (B). No experimento I, cinco palhetas dos diluidores A e B de cada touro foram descongeladas e avaliadas quanto à motilidade, vigor, concentração, morfologia espermática e teste de termor-resistência lento. Foram feitas, ainda, avaliação da integridade de membranas, por meio da associação das sondas iodeto de propídio, isotiocionato de fluoresceína - Pisum sativum e carbocianina catiônica lipofílica, e avaliação funcional da membrana plasmática com teste hiposmótico. A avaliação da integridade da cromatina foi realizada pelo método de coloração com laranja de acridina. No experimento II, o sêmen com os diferentes diluidores foi utilizado na fecundação in vitro, sendo observadas taxas de clivagem e desenvolvimento embrionário in vitro. Em relação aos resultados obtidos, apenas a porcentagem de espermatozoides no sêmen congelado foi discretamente maior com o diluidor A, concluindo-se que o diluidor composto por lecitina de soja pode substituir o composto por Tris e gema de ovo, respeitando-se as variações individuais de cada touro utilizado no presente experimento.
Highlights
The goal of this study was to evaluate the protective effect of egg yolk compared with a soybean lecithinbased extender on morphologic and functional characteristics of frozen bovine semen
A diluição do sêmen é imprescindível antes de submetê-lo à congelação, e os diluidores são utilizados com a finalidade de proteger os espermatozoides, oferecendo condições mínimas de sobrevivência no trato reprodutivo da fêmea para que ocorra a fertilização
A análise da motilidade espermática subjetiva, do vigor e da integridade da cromatina (LA) foi realizada em todas as amostras de sêmen após a descongelação e após a realização do TTL para ambos os diluidores
Summary
Foram utilizados quatro touros da raça Nelore em idade reprodutiva, mantidos em regime semiextensivo. Para o HIPO, as células foram classificadas quanto à presença ou não de cauda dobrada ou enrolada, e o resultado foi determinado em porcentagem, efetuando-se o cálculo pela fórmula: HIPO (%) = (% de alterações na região da cauda após teste HIPO) – (% de alterações na região da cauda dos espermatozoides antes do teste HIPO). Para o experimento II (produção in vitro de embriões), uma palheta dos diluidores A e B de cada touro foi utilizada na PIV, realizando-se oito repetições por amostra, sendo utilizados 25 oócitos em cada repetição. As variáveis motilidades subjetiva e computadorizada, vigor, integridade da cromatina, do acrossoma, da membrana plasmática e potencial mitocondrial foram analisadas pelo teste de Wilcoxon, e a porcentagem de clivagem, de embriões e de eclosão foi submetida à análise de variância (ANOVA), com médias comparadas pelo teste de Tukey, utilizando-se programa computacional “Statistical Analysis System” (SAS, 2004), com nível de significância de 5%
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