Direct competitive enzyme immunoassay method for the determination of ochratoxin a in feeds and foods

I I Vashkevich,O V Sviridov,N P Perebora,D A Semenov,I V Gorbachova,O S Kuprienko,A I Shibeko,A A Yastrebova,L N Sukhenko,G S Kornilovich

doi:10.29235/1561-8331-2019-55-1-69-78

Abstract

A reagent kit EIA-OCHRATOXIN A for the determination of mycotoxin ochratoxin A in feeds and foods by a direct competitive enzyme immunoassay using microtitration plate has been developed and tested. The conjugate of ochratoxin A with horseradish peroxidase was synthesized using the mycotoxin aminoderivative joined to the carbohydrate chain of the enzyme. A monoclonal antibody to the mycotoxin was immobilized on the surface of plate wells through sheep anti-mouse antibodies. The evaluated parameters of the kit and metrological characteristics of the technique of measurements correspond to the modern level of immunoassay development and provide the determination of ochratoxin A content of agricultural products in a range of 5 to 375 mg/kg with proper accuracy and precision. The limit of quantitative determination of ochratoxin A in grain and cereal foods does not exceed 5 mg/kg.

Highlights

synthesized using the mycotoxin aminoderivative joined to the carbohydrate chain of the enzyme
A monoclonal antibody to the mycotoxin was immobilized on the surface of plate wells
metrological characteristics of the technique of measurements correspond to the modern level of immunoassay development

Summary

BIOORGANIC CHEMISTRY

Разработан и испытан набор реагентов «ИФА-ОХРАТОКСИН А» для определения охратоксина А в кормах и пищевой продукции методом прямого конкурентного иммуноферментного анализа в микропланшетном формате. Конъюгат охратоксина А с пероксидазой из корней хрена получен с использованием аминопроизводного микотоксина, присоединенного к углеводной цепи фермента. Установлены технико-аналитические параметры набора «ИФА-ОХРАТОКСИН А» и метрологические характеристики методики выполнения измерений. Набор позволяет с надлежащей точностью определять охратоксин А в диапазоне содержания от 5 до 375 мкг/кг, предел количественного определения микотоксина в зерне и в продуктах его переработки составляет 5 мкг/кг. Ключевые слова: микотоксины, охратоксин А, иммуноферментный анализ Для цитирования. Метод прямого конкурентного иммуноферментного анализа для определения охратоксина А в кормах и пищевых продуктах / И.

Предписанное значение

Контрольный образец

Список использованных источников

Информация об авторах

Information about the authors