Diagnóstico etiológico de enfermidades do sistema nervoso central de equinos no Estado de Minas Gerais, Brasil

E.A Costa,T.S Oliveira,R.L Santos,A.A Fonseca Júnior,R Furtini,T.A Paixão,R Rosa

doi:10.1590/1678-6765

Abstract

O Brasil possui o quarto maior rebanho equino do mundo, e o Estado de Minas Gerais detém o maior número de equinos do país. Portanto, um diagnóstico preciso das doenças neurológicas dos equinos é prioridade no estado. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi identificar, utilizando a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), os agentes infecciosos responsáveis por enfermidades que afetam o sistema nervoso central (SNC) de equinos. De janeiro de 2009 a janeiro de 2011, foi realizado um levantamento dos casos de encefalites e encefalomielites em equinos no Estado de Minas Gerais, utilizando-se amostras de SNC de equinos que morreram com sinais neurológicos. Das 217 amostras de SNC, 47 (21,7%) foram positivas para o vírus da raiva pelo método de imunofluorescência indireta e inoculação em camundongos. Nas 170 amostras negativas para o vírus da raiva, o herpes-vírus equino-1 (EHV-1) foi diagnosticado em 20 (11,8%) e o herpes-vírus suíno-1 (SHV-1), em uma amostra por meio de PCR, e o vírus encefalite de Saint Louis (SLEV), em outra amostra, através de transcrição reversa (RT) e PCR (RT-PCR). Constatou-se que o vírus da raiva é o principal agente causador de encefalite em equinos, apesar do crescente número de casos de encefalomielite associados ao EHV-1 no Estado de Minas Gerais.

Highlights

O Brasil possui o quarto maior rebanho equino do mundo, com aproximadamente 5,5 milhões de animais, e o Estado de Minas Gerais detém o maior número de equinos do país (IBGE, 2011)
an accurate diagnosis of cases of neurologic diseases is a priority in Minas Gerais
The aim of this study was to identify by Polymerase Chain Reaction

Summary

MATERIAL E MÉTODOS

Amostras de SNC provenientes de equinos que foram a óbito após sintomatologia neurológica foram coletadas em Minas Gerais por médicos veterinários autônomos e oficiais e encaminhadas ao Laboratório de Saúde Animal do IMA no período de janeiro de 2009 a janeiro de 2011. O RNA total das amostras de SNC foi extraído segundo método de extração pelo Trizol (Invitrogen Life Technologies, EUA), de acordo com as instruções do fabricante. Para detecção dos EHV-1, EHV-4 e SHV-1, 200ng de DNA total foi utilizada como molde na primeira reação de amplificação contendo 30μL de mix de PCR comercial (Supermix PCR, Invitrogen, Brasil) e 1μM de cada oligonucleotídeo iniciador. Os oligonucleotídeos iniciadores específicos utilizados para detecção dos EHV-1, EHV-4 e SHV-1 foram desenhados e descritos previamente (Varrasso et al, 2001; Fonseca Jr. et al, 2011). As reações de amplificação de parte dos genes estruturais dos WEEV, VEEV (Eshoo et al, 2007), EEEV, WNEV (Johnson et al, 2003) e SLEV (Ré et al, 2008) foram feitas utilizando-se oligonucleotídeo iniciadores específicos previamente descritos para cada tipo viral. Frequências foram comparadas pelo teste exato de Fisher utilizando-se o GraphPad Instat software

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Findings

Raça Pura