Diagnostic value of miRNA-101 and miRNA-27 in acute heart transplant rejection

D A Velikiy,S O Sharapchenko,O P Shevchenko,R M Kurabekova,N P Mozheiko,O E Gichkun

doi:10.15825/1995-1191-2020-4-20-26

Abstract

Objective : to determine the diagnostic value of miRNA-101 and miRNA-27 expression levels for acute heart transplant rejection. Materials and methods . The study enrolled 46 heart recipients, among whom were 36 men (78.3%); the average age of recipients was 47.7 = 10.8 (16 to 67) years. Serum microRNA expression levels were measured via quantitative polymerase chain reaction (PCR). Graft rejection was verified through morphological analysis of endomyocardial biopsy specimens. Results. The expression levels of miRNA-101 and miRNA-27 in recipients with acute graft rejection are significantly lower than in recipients without rejection (p = 0.04 and p = 0.03, respectively). When the miRNA-101 expression level is below the determined threshold value, the risk of developing acute graft rejection increases 1.8 times (RR = 1.8 [95% CI 1.13–3.01]). When the miRNA-27 expression level is below the determined threshold value, the risk of developing acute graft rejection increases 1.9 times (RR = 1.9 [95% CI 1.12–3.37]). Simultaneous decrease in the expression levels of miRNA-101 and miRNA-27 below the determined threshold values increases the likelihood of acute graft rejection by 2.0 times (RR = 2.0 [95% CI 1.16–3.36]). Conclusion . The serum miRNA-101 and miRNA-27 expression levels are of diagnostic value for acute graft rejection in heart recipients.

Highlights

Objective: to determine the diagnostic value of miRNA-101 and miRNA-27 expression levels for acute heart transplant rejection
Serum microRNA expression levels were measured via quantitative polymerase chain reaction (PCR)
When the miRNA-101 expression level is below the determined threshold value, the risk

Summary

Материалы и методы

В исследование включены 46 пациентов, которым в период с 2013-го по 2016 год в ФГБУ «НМИЦ ТИО им. ак. Материалом для исследования экспрессии микроРНК служила плазма венозной крови (от 1 до 3 образцов от каждого пациента, в среднем 1,22). Из 100 мкл плазмы крови с использованием наборов Serum Plasma (Qiagen, США) выделяли суммарную РНК с предварительным добавлением 1,6 × 108 копий синтетической микроРНК cel-miR-39 (Qiagen) после инкубации плазмы с фенольной смесью Qiazol. В качестве внутреннего контроля эффективности выделения РНК, синтеза комплементарной ДНК (кДНК) и количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени использовали Cel-miR-39. Верификацию острого клеточного и гуморального отторжения трансплантата производили на основании исследования образцов эндомиокардиальных биоптатов. Для диагностики острого клеточного отторжения (ОКО) срезы окрашивали гематоксилином и эозином, для диагностики гуморального отторжения (AMR) использовали иммуногистохимический метод исследования. Степень острого клеточного и гуморального отторжения трансплантата оценивали по рекомендованным классификациям, принятым Международным обществом трансплантации сердца и легких (ISHLT-2004 и ISHLT-2013)

Статистическая обработка данных

Findings

Результаты и обсуждение