Development and validation of a method for simultaneous determination of pseudouridine and creatinine in human urine: Evaluation's Index Pseudouridona/Creatinine in smokers and no-smokers

Abstract

La excrecion de pseudouridina, esta incrementada en procesos inflamatorios relacionados con perdida de masa muscular encontrada en pacientes con afectacion pulmonar. Material y metodos: se desarrolla y valida, un metodo, mediante HPLC, para la determinacion simultanea de pseudouridina y creatinina en orina. Como fase estacionaria se utilizo una columna LiCHrospher® 100 RP-18 (5 ?m) LiCHroCART® 250-4 (Merck). Fase movil consistente en un tampon fosfato 0,01 M (pH = 6,1) conteniendo octanosulfonico 3mmol como agente de par ionico, y longitud de onda de 250 nm. La preparacion de la muestra se basa en una dilucion y filtracion. La linealidad del metodo fue satisfactoria dentro del rango de concentracion de 0,23-22,5 nmol/ml para pseudouridina y 1,45-1100 nmol/ml para creatinina, con limites de cuantificacion de 0,175 y 8,59 nmol/ml, respectivamente.