Determination of V617F mutation and JAK2 mRNA expression in venous blood of patients with COVID-19

Abstract

<h3></h3> Учитывая важное патогенетическое значение «цитокинового шторма» при отдельных вариантах тяжелых форм инфекции COVID-19, в данной работе предпринята попытка оценить возможное диагностическое значение янускиназы-2 (JAK2) в связи с ее активным участием в реализации провоспалительных цитокиновых сигналов. В качестве маркеров активности JAK2 использовали определение активирующей соматической мутации V617F и уровня экспрессии мРНК гена<i> JAK2</i>. <h3>ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ</h3> Определение мутации V617F JAK2 и исследование уровня экспрессии мРНК гена<i> JAK2</i> в крови у пациентов с инфекцией COVID-19. <h3>МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ</h3> В исследование включены анонимные (слепые) пробы крови 61 пациента, госпитализированного с подтвержденной инфекцией COVID-19 в ковидный госпиталь. В качестве контроля использовали 39 образцов крови добровольцев и доноров крови, собранные до начала эпидемии. Пробы венозной крови у пациентов забирали в первые 10 дней со дня госпитализации в вакутейнеры с ДНК/РНК стабилизатором. Выделение РНК осуществляли с использованием набора реагентов Рибо-золь-D (ФБУН «ЦНИИЭ», Россия) в соответствии с инструкцией производителя. Обратную транскрипцию проводили с использованием набора реагентов Реверта-L (ФБУН «ЦНИИЭ», Россия) в соответствии с инструкцией производителя. Определение уровня экспрессии мРНК гена <i>JAK2</i>, а также мутации JAK2 V617F методом ПЦР-РВ выполняли с использованием наборов ООО «Формула гена». <h3>РЕЗУЛЬТАТЫ</h3> Мутация JAK2 V617F не была обнаружена ни в одной из проб пациентов с COVID-19. Уровень экспрессии мРНК гена <i>JAK2</i> в лейкоцитах пациентов с COVID-19 характеризовался высокой межиндивидуальной вариацией, при этом показатели экспрессии были значимо снижены у пациентов с COVID-19. <h3>ВЫВОДЫ</h3> Среди госпитализированных пациентов с COVID-19 не было выявлено лиц с соматической мутацией V617F JAK2. Высокая вариация и сниженные медианные значения уровня экспрессии мРНК гена <i>JAK2</i> при инфекции COVID-19 свидетельствуют об участии JAK2-сигнального пути в патогенезе и будут предметом дальнейших исследований, в том числе для оценки значимости теста в качестве показания для назначения и оценки эффективности ингибиторов янус-киназ.