Determination of infestation rate of Ixodidae ticks to Theileria annulata in Urmia region by polymerase chain reaction (PCR)

Abstract

تیلریوز یکی از بیماری‌های مهم انگلی تک‌یاخته‌ای در ایران می­باشد که باعث بروز ضررهای اقتصادی و مرگ‌ومیر در دام‌ها می­شود. این بیماری توسط کنه‌های خانواده ایکسودیده منتقل می‌شود و با تب، کم­خونی، آنوکسی و نهایتا مرگ دام همراه است. تشخیص بیماری سابقا بر اساس رنگ‌آمیزی نمونه‌های خونی و غدد لنفاوی با روش گیمسا انجام می‌پذیرفت. استفاده از روش‌های مولکولی به دلیل بالا بودن حساسیت و ویژگی نسبت به روش‌های قبلی ارجحیت دارد. به­دلیل این­که در دامداری‌های سنتی ایران کنه‌های ایکسودیده که می‌توانند ناقل بیماری باشند به­فراوانی یافت می‌شوند، شناسایی این کنه‌ها اهمیت فراوان دارد. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی آلودگی به تیلریا در کنه­های جداشده از گاوهای منطقه ارومیه انجام پذیرفت. تعداد 100 کنه از گله­های با تاریخچه آلودگی به تیلریا در منطقه جمع­آوری و با استفاده از کلیدهای تشخیص شناسایی شدند. از مجموع 100 کنه مورد آزمایش، تک‌یاخته‌های انگلی هیالوما ­آناتولیکوم ‌آناتولیکوم (33 درصد)، هیالوما دیتریتوم (16 درصد)، بووفیلوس ‌آنولاتوس (16 درصد)، درماسنتور مارژیناتوم (14 درصد)، ریپیسفالوس بورسا (9 درصد)، هیالوما آناتولیکوم ‌اکسکاواتوم (7 درصد)، درماسنتور نیووس (4 درصد) و همافیزالیس پونکتاتا (1 درصد) شناسایی شدند. کنه غالب هیالوما آناتولیکوم ‌آناتولیکوم تشخیص داده شد. غدد بزاقی کنه­ها پس از جداسازی با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی مربوط به گونه تیلریا آنولاتا (N516 وN517) مورد آزمایش PCR قرار گرفتند. آزمایش PCR وجود باند اختصاصی با اندازه bp 721 ناشی از وجود تیلریا آنولاتا را روی ژل آگارز در 62 درصد کنه ها مشخص ساخت. میزان بالای آلودگی در کنه­های ناقل موجود در منطقه پتانسیل بالای آن‌ها را در راه آلودگی گاوها به عامل تیلریا آنولاتا را می­رساند.