Detection, quantification and genetic variability of Mycoplasma hyopneumoniae from apparently healthy and pneumonic swine

Abstract

<p>As diferenças moleculares entre as estirpes de <em>Mycoplasma hyopneumoniae </em>presentes em pulmões de suínos com pneumonia tem sido estudadas. Porém, estudos comparativos relativos as estirpes presentes nos suínos aparentemente saudáveis não foram levados a cabo. O objetivo do estudo foi a detecção, quantificação e analise molecular de <em>M. hyopneumoniae </em>nos pulmões suínos com e sem lesões pneumônicas. Para a detecção de <em>M. hyopneumoniae </em>usaramse o PCR Multiplo (YAMAGUTI, 2008), o PCR a Tempo Real (STRAIT et al., 2008) e a amplificação de múltiplo VNTR (VRANCKX et al., 2011). A caracterização molecular das estirpes foi realizada mediante a análise do número de copias de VNTR em P97R1, P146R3, H2R1 e H4. O <em>M. hyopneumoniae </em>foi detectado em amostras de suínos saudáveis e pneumônicos e a quantidade de <em>M. hyopneumoniae </em>nas amostras positivas variou com o tipo de ensaio. O maior número de amostras positivas foi identificado pela amplificação de múltiplas VNTR combinado com a eletroforese de capilares. Usando o PCR a Tempo Real, 4.9*104 copias de genoma/mL de <em>M. hyopneumoniae </em>foram detectadas em pulmões aparentemente saudáveis. Uma quantidade média de 3.9*106 copias de genoma/mL de <em>M. hyopneumoniae </em>foi detectada em pulmões pneumônicos. A análise do número de copias de VNTR demonstrou uma elevada variabilidade.</p>