Abstract
Bacteria of Campylobacter genus are ones of the main zoonotic pathogens causing human and animal diseases. Campylobacter organisms are microaerophiles and, therefore, require low oxygen concentration (3–5%) and high carbon dioxide concentration (3–10%) for their growth. They use amino acids rather than carbons as a source of energy. Classical bacteriological methods for Campylobacter spp. detection are not always successful due to diffi culties in creating optimal conditions for their growth. Therewith, development and implementation of molecular methods for Campylobacter detection and identifi cation are of current importance. Assay for qualitative Campylobacter spp. detection with real-time polymerase chain reaction using CFX-96 thermocycler was optimized. Highly specifi c segment of 16S rRNA gene allowing identifi cation of 6 Campylobacter species: C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis, C. helveticus и C. hyointestinalis was selected as an amplifi cation target. Optimal magnesium ion concentration (2.5 мМ) and primer annealing temperature (58 °С) were determined. Eighteen reference strains of various bacteria were tested. Only tests of Campylobacter genus strains gave positive results. The method sensitivity was 40 target molecules. The said method was used for testing 76 samples of raw materials of animal origin. Campylobacter spp. genome was detected in 18 samples. Obtained results showed that the optimized variant of real-time polymerase chain reaction based on 16S rRNA gene amplifi cation was a specifi c, sensitive, rapid, reproducible and accurate method for qualitative detection of Campylobacter spp. in samples of raw animal materials.
Highlights
Бактерии рода Campylobacter являются возбудителями инфекционных болезней, проявляющихся у млекопитающих абортами, временным бесплодием, задержанием последа, вагинитами, метритами, рождением нежизнеспособного молодняка, а у кур – снижением прироста массы бройлеров, яйценоскости курнесушек и падежом цыплят
Методы лабораторной диагностики кампилобактериоза и производственного бактериологического контроля продуктов животноводства основаны на выделении чистой культуры возбудителя из биологического материала животных посредством посевов на кровяной или эритритный агар с железо-сульфитопируватными добавками
Diversity of serotypes of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli isolated in laboratory animals / N
Summary
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ. Классические бактериологические методы выявления бактерий рода Campylobacter не всегда являются успешными из-за сложности обеспечения оптимальных условий для их роста. Была оптимизирована методика качественного обнаружения генома бактерий Campylobacter spp. Посредством полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием термоциклера CFX-96. Полученные результаты показывают, что оптимизированный вариант полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, основанный на амплификации гена 16S pРНК, представляет собой специфичный, чувствительный, быстрый, воспроизводимый и точный метод для качественного обнаружения Campylobacter spp. Ключевые слова: Campylobacter spp., полимеразная цепная реакция в реальном времени, сырье животного происхождения. Рутинное выявление кампилобактерий микробиологическим методом с использованием селективного обогащения для уменьшения роста фоновой микрофлоры с последующей биохимической идентификацией в первую очередь направлены на обнаружение C. jejuni и C. coli. Посредством ПЦР-РВ в образцах продуктов животного происхождения и биологическом материале от животных Целью работы была оптимизация методики выявления генома Campylobacter spp. посредством ПЦР-РВ в образцах продуктов животного происхождения и биологическом материале от животных
Sign-in/Register to view highlights & summary Sign-in/Register to access full text options 
Free) 
Talk to us
Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have
Schedule a call
