Detecção simultânea de fatores de resistência à murcha de fusário do tomateiro por meio de PCR multiplex

Renato Carrer Filho,Érico De Campos Dianese,Vanessa Duarte Dias,Leonardo Silva Boiteux,Renata Maria De Oliveira,Marcos Gomes Da Cunha

doi:10.1590/s0100-204x2016000800004

Renato Carrer Filho, Érico De Campos Dianese + Show 4 more

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https://doi.org/10.1590/s0100-204x2016000800004

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Abstract

Resumo: O objetivo deste trabalho foi elaborar e validar um protocolo de detecção simultânea, via reação em cadeia da polimerase multiplex (PCR multiplex), de regiões genômicas do tomateiro (Solanum lycopersicum) associadas a fatores de resistência às três raças fisiológicas de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL). Os pares de iniciadores empregados foram SSR-67 (específico para o gene I-1), TFusrr (específico para o gene I-2) e SSRD (específico para o gene I-3). Os resultados de genotipagem com marcadores moleculares foram comparados aos resultados de fenotipagem de uma coleção de germoplasma de tomateiro, em bioensaios de inoculação de isolados das três raças de FOL em plântulas, pelo método de imersão das raízes. A resistência ou a suscetibilidade foi confirmada por PCR, por meio de visualização dos âmplicons específicos para as regiões-alvo ligadas aos fatores de resistência às distintas raças de FOL. O protocolo elaborado para o uso conjunto dos marcadores moleculares, em PCR multiplex, permite a seleção de acessos de tomateiro resistentes às raças 1, 2, e 3 de F. oxysporum f. sp. lycopersici de maneira similar à realizada com a utilização de cada um separadamente. O PCR multiplex representa uma ferramenta viável para monitorar a incorporação desses fatores de resistência em linhagens de tomateiro.

Highlights

A murcha de fusário do tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é causada pelo fungo Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL), que apresenta três raças fisiológicas e é um dos principais problemas fitossanitários da cultura no Brasil (Reis et al, 2005; Reis & Boiteux, 2007; Gonzalez‐Cendales et al., 2016)
Designados como I‐1, I‐2, I‐3 e I‐7 foram caracterizados em espécies selvagens de Solanum (Lycopersicon) e introgredidos em cultivares comerciais de tomateiro (Huang & Lindhout, 1997; Houterman et al, 2008)
Sistemas de marcadores moleculares específicos foram desenvolvidos e já se encontram disponíveis para monitorar as regiões genômicas que contêm os fatores de resistência I‐1 (Parmar & Subramanian, 2011), I‐2 (El Mohtar et al, 2007) e I‐3 (Scott et al, 2004; Lim et al, 2008)

Summary

Introduction

A murcha de fusário do tomateiro (Solanum lycopersicum L.) é causada pelo fungo Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (FOL), que apresenta três raças fisiológicas e é um dos principais problemas fitossanitários da cultura no Brasil (Reis et al, 2005; Reis & Boiteux, 2007; Gonzalez‐Cendales et al., 2016). As raças fisiológicas de FOL em tomateiro são caracterizadas de acordo com a capacidade de infectar e causar doença a acessos diferenciadores que carregam distintos genes e loci de resistência.

Objectives

Results

Conclusion