Abstract

Aim. Study of biological properties in natural strains of genovariants of V. cholerae biovar El Tor, affecting their adaptation capacities under nutrient deficiency while comparing them with typical strains. Materials and methods. Competitive sampling was carried out through plating a mixture of cells of the two strains under investigation into autoclaved river water. Growth rate was evaluated through the optic density values. Gene expression was studied applying RT-PCR with designed primers and probes. Results. It is established that during combined cultivation of V. cholerae El Tor typical strains and genovariants under the shortage of nutrient substances (autoclaved river water), at room temperature, the level of survivability in genetically altered strains is higher than in typical strains, which points to their expressed adaptation advantages over the typical ones under the stated conditions. It is demonstrated that selective benefits of genovariant strains are provided by higher cell growth rate and increased rpoS gene expression. Conclusion. Obtained have been new data on the ability of bacterial strains of V. cholerae El Tor genovariants to rapidly grow and better express global regulator of stress response, rpoS gene, which, probably, contributes to their enhanced adaptation not only under nutrient deficiency, but under the influence of other stress factors too.

Highlights

  • МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫИсследования были проведены на 8 штаммах V. cholerae биовара El Tor, полученных из Государственной коллекции патогенных бактерий РосНИПЧИ «Микроб» (Саратов).

  • Штаммы выращивали на LB агаре при температуре 370С в течение ночи и готовили в физиологическом растворе суспензии одинаковой оптической плотности (ОП), контролируя её на спектрофотометре «Biowave DNA» (Biochrom Ltd, Англия).

  • Параллельно для контроля выживаемости исследуемые штаммы засевали в автоклавированную воду по отдельности.

Read more

Summary

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследования были проведены на 8 штаммах V. cholerae биовара El Tor, полученных из Государственной коллекции патогенных бактерий РосНИПЧИ «Микроб» (Саратов). Штаммы выращивали на LB агаре при температуре 370С в течение ночи и готовили в физиологическом растворе суспензии одинаковой оптической плотности (ОП), контролируя её на спектрофотометре «Biowave DNA» (Biochrom Ltd, Англия). Параллельно для контроля выживаемости исследуемые штаммы засевали в автоклавированную воду по отдельности. Посевы культивировали при комнатной температуре (22-25оС), делая высевы на агар LB как из смеси, так и из контрольных проб, и подсчитывали число выросших колоний. При длине волны 600 нм на спектрофотометре «Biowave DNA» (Biochrom Ltd, Англия) через 4 часа выращивания в LB бульоне. Для изучения экспрессии штаммы выращивали в течение 4 часов в LB бульоне на шейкере при 37 оС. Определение концентрации выделенных препаратов РНК и их выравнивание проводили на спектрофотометре «Biowave DNA». Нормирование полученных данных проводили относительно конститутивно экспрессирующегося гена recA методом. ПЦР проводили на трех независимо полученных образцах кДНК.

РЕЗУЛ ЬТАТ ЫИОБСУЖДЕНИЕ
Скорость роста**
Full Text
Published version (Free)

Talk to us

Join us for a 30 min session where you can share your feedback and ask us any queries you have

Schedule a call