Abstract
Vários estudos estão sendo conduzidos para a descoberta de novos agentes antimicrobianos provenientes de plantas, para que possam ser utilizados em produtos farmacêuticos, cosméticos e na indústria alimentícia. A ausência de padronização de métodos utilizados para a avaliação de extratos vegetais com potencial antimicrobiano dificulta a comparação de resultados. Considerando a necessidade de estabelecer um método com resultados consistentes para avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos vegetais, este trabalho propôs-se a avaliar a atividade antimicrobiana e determinar a concentração mínima inibitória de extratos de plantas da família Myrtaceae sobre diferentes micro-organismos, utilizando três métodos para avaliação de antimicrobianos. Os métodos empregados foram microdiluição em caldo e difusão em ágar por disco e poço. Foram avaliados os extratos de Psidium guajava, Myrciaria cauliflora e Syzygium cumini sobre bactérias Gram-positivas, negativas e levedura. Em geral, a inibição promovida pelos extratos no teste de difusão em ágar por poço foi maior do que os valores obtidos por disco, independentemente do extrato vegetal testado. Contudo, a atividade inibitória de todos os micro-organismos só pôde ser determinada com o método de microdiluição em caldo, que também apresentou os resultados mais reprodutíveis, e mostrou-se o mais econômico e confiável para se avaliar a atividade antimicrobiana de extratos vegetais quando comparado aos outros métodos
Highlights
Several studies have been conducted to discover new antimicrobial agents from plants to be used in pharmaceuticals, cosmetics and in the food industry
Embora geralmente sejam utilizadas as normatizações internacionalmente conhecidas do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) como base para testes de suscetibilidade antimicrobiana, as diretrizes são direcionadas para antimicrobianos com parâmetros já conhecidos
Foram utilizados os métodos microdiluição em caldo, com base na metodologia de Santurio et al (2007), com modificações, e as metodologias de difusão em ágar por poço e por disco, realizadas conforme recomendações do CLSI (2009a)
Summary
As folhas das plantas P. guajava (goiabeira branca – voucher 6900), M. cauliflora (jabuticabeira – 6882) e S. cumini (jambolão – voucher 6898) foram coletadas nas primeiras horas da manhã, nos meses de janeiro e fevereiro, em propriedades rurais no município de Medianeira (PR). As folhas das plantas coletadas foram secas a 40°C e trituradas em moinho de facas do Tipo Willye, até a obtenção de pó de granulometria inferior a 0,42 mm. Para obtenção do extrato etanólico adicionou-se pó ao álcool etílico PA na proporção de 2:10 (p/v) para maceração por 24 horas, em shaker rotativo, a 180 rpm, a 23°C. O extrato obtido foi diluído com água destilada estéril contendo 10% de dimetilsulfóxido (DMSO) para a proporção final de 200 mg.mL-1 e esterilizado por filtração em membrana filtrante com porosidade de 0,45 mm. Para a obtenção do extrato aquoso, a maceração foi realizada utilizando-se como solvente extrator a água destilada estéril, contendo 10% de DMSO, seguindo os mesmos padrões de proporção, armazenamento e filtragem do extrato etanólico. Ambos os extratos foram armazenadas em freezer a -18oC até o momento do uso
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